Určení mechanismu vstupu F. tularensis do B lymfocytů

Abstract

Barbora Hadámková Určení mechanismu vstupu F. tularensis do B lymfocytů Diplomová práce Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studijní obor: Farmacie Cíl práce: Vedle zpracování rešerše se základními poznatky z problematiky, bylo hlavním cílem této práce analyzovat mechanismus vstupu intracelulární bakterie Francisella tularensis do B buněk. Metody: Na B buňkách získaných peritoneálním výplachem z myší Balb/c jsme blokovali vybrané komplementové receptory, receptor B buněk a Fcƴ receptor. B buněčnou populaci jsme infikovali bakterií F. tularensis LVS/GFP opsonizovanou komplementem a/nebo protilátkami. Pomocí průtokového cytometru jsme měřili procento infikovaných B buněk a jejich subpopulací, konkrétně B1a, B1b a B2, a hodnotili jsme vliv blokace a opsonizace na procentuální zastoupení infikovaných B buněk. Výsledky: Z naměřených dat můžeme říci, že se procento infikovaných B buněk po infekci F. tularensis opsonizovanou komplementem zvýší. Toto zvýšení bylo výraznější u subtypů B buněk B1b a B2. Naopak opsonizace F. tularensis protilátkami infekci nijak neovlivnila. Zjistili jsme také, že blokace receptoru Fcƴ snížila infekci, když byla k infekci B buněk použita bakterie s opsonizací komplementem a protilátkami zároveň. Při blokaci komplementových receptorů jsme významné...

Barbora Hadámková Determination the mechanism of entry F. tularensis into B lymphocytes Diploma thesis Charles University, Faculty Of Pharmacy in Hradec Králové Study program: Pharmacy Background: Besides processing the research with basics knowledge of the problem, the main aim of the study was the analysis of mechanism of entrance of intracellular bacteria Francisella tularensis into B cells. Methods: The B cells, which we obtained through peritoneal lavage from mice Balb/c, we blocked using antibodies individual complement receptors, B cell receptor and Fcƴ receptor. The population of the cells was infected by bacteria F. tularensis LVS/GFP opsonized by complement and/or by antibodies. Using flow cytometry we measured the percentage of infection of individual subpopulations of B cell B1a, B1b and B2 and we evaluated the influence of blocking and opsonization on the infection. Results: From the measured data, we can say that the percentage of infected B cells after infection by F. tularensis opsonized by complement is increased. This increase was more distinct in subtype of B cells B1b and B2. On the other hand, the opsonization F. tularensis by antibodies did not affect the infection. We also found out, that blocking of Fcƴ receptor has decrease the infection, if we used for infection of B cells...