Analytické hodnotenie liečiv s využitím HPLC IV.

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Analysis Candidate: Kristína Mojšová Supervisor: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Title of master's thesis: Analytical evaluation of drugs using HPLC IV. This thesis describes development of the suitable method for ketoprofen analysis by high performance liquid chromatography. For this aim a LiChro CART® 125-4 Lichrospher® 100 RP-18 (5 μm) column was used as a stationary phase and mobile phase contained mixture of methanol and aqueous KH2PO4 buffer (pH 3,4) in a ratio of 60:40 (v/v). The flow rate was set to 1 ml/min, temperature on the column was 25 řC and substances were detected at a wave length of 254 nm. Under these conditions final retention time of ketoprofen was 7,9 minutes. Benetazon was chosen as an appropriate internal standard for the quantitative evaluation. In the next part we were looking for suitable conditions for the chiral separation of the analyzed drug by using normal and reverse mode. Separation of ketoprofen's enantiomers was carried out on a Chiralcel OD-R, 250 x 4,6 mm, from Daicel Chemical Industries using a mobile phase of heptane and 2-propanol in a ratio of 97:3, with the addition of 0,6 ml formic acid. At a flow rate of 0,7 ml/min, retention times took about 20 minutes....

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Kristína Mojšová Školiteľ: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Názov diplomovej práce: Analytické hodnotenie liečiv s využitím HPLC IV. Táto práca sa zaoberá vývojom vhodnej metódy pre analýzu ketoprofénu pomocou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Ako stacionárna fáza bola použitá kolóna LiChro CART® 125-4 Lichrospher® 100 RP-18 (5 μm), mobilná fáza obsahovala zmes metanolu a roztoku KH2PO4 (pH 3,4) v pomere 60:40 (v/v). Prietoková rýchlosť bola 1 ml/min, teplota kolóny 25 řC a látky boli detegované pri vlnovej dĺžke 254 nm. Za týchto podmienok bol výsledný retenčný čas ketoprofénu 7,9 minút. Pre kvantitatívne hodnotenie bol ako vhodný vnútorný štandard zvolený benetazon. V ďalšej časti práce boli hľadané podmienky pre chirálnu separáciu analyzovaného liečiva za použitia normálneho ako aj reverzného módu. Pre analýzu ketoprofénu bola zvolená kolóna Chiralcel OD-R, 250 x 4,6 mm od firmy Daicel Chemical industries a mobilná fáza heptán : 2-propanol v pomere 97:3 s prídavkom 0,6 ml kyseliny mravčej. Pri prietoku 0,7 ml/min boli získané retenčné časy okolo 20 minút. Na záver bola vykonaná extrakcia ketoprofénu z ľudskej plazmy, pre ktorú bola vybraná metóda extrakcie v systéme...