Vliv methylviologenu na produkci sekundárních látek v in vitro kultuře Genista tinctoria

Abstract

Elicitation is one of possible methods for increasing the secondary metabolites production in plant cell cultures. This paper explores the potential effect of methylviologene on isoflavonoids production in Genista tinctoria L. suspension and callus cultures. Schenk and Hildebrandt nutrient medium was used with the addition of growth regulators 2,4- D in concentration of 5 mg/L and kinetin of 1 mg /L of medium. Elicitor was added in the form of ethanol solution at concentration of 2.19·10-2 mol l-1 , 2.19·10-3 mol l-1 , 2.19·10-4 mol l-1 . Samples were taken after 6, 12, 24, 48, 72 and 168 hours of elicitor exposure. Control samples were collected at 6, 24, 72 and 168 hours. The isoflavonoid content in suspension and callus cultures and in nutrient medium was evaluated by high performance liquid chromatography. The biggest increase of isoflavonoid content in callus culture was reached in daidzein content after 48 hours elicitor treatment in concentration of 2.19·10-3 mol l-1 (8.5 mg/g DW) and 2.19·10-4 mol l-1 (1.6 mg/g DW). The production of genistin, genistein and formononetin was slightly increased or zero compared to controls. Biochanin A was almost absent in the samples. The highest level of isoflavonoids was measured in the suspension culture after 48 hours elicitor application in the...

Elicitace je jedna z metod pro zvýšení produkce sekundárních metabolitů v rostlinných kulturách. Tato práce zkoumá potencionální vliv elicitoru methylviologenu na produkci izoflavonoidů v suspenzní a kalusové kultuře Genista tinctoria L. Jako živné médium bylo použito médium dle Schenka a Hildebrandta s přídavkem růstových regulátorů 2,4-D 5 mg/L média a kinetinu 1 mg/L do média. Elicitor-methylviologen byl přidán ve formě roztoku v koncentraci c1 - 2,19·10-2 mol l-1 , c2 - 2,19·10-3 mol l-1 a c3 - 2,19·10-4 mol l-1 . Vzorky byly odebírány po 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hodinách působení elicitoru. Kontrolní vzorky bez elicitoru byly odebírány v 6, 24, 72 a 168 hodině. Obsah izoflavonoidů v sušině i médiu suspenzních a kalusových kultur byl vyhodnocen pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Nejvyšší nárůst obsahu izoflavonoidů byl v kalusové kultuře zaznamenán u daidzeinu (8,5 mg/g DW) v 48 hodině po elicitaci methylviologenem v koncentraci c2 - 2,19·10-3 mol.l-1 a v koncentraci c3 - 2,19·10-4 mol l-1 (1,6 mg/g DW). Produkce genistinu, genisteinu a formononetinu po elicitaci byla mírně zvýšená nebo nulová oproti kontrole. Biochanin A se elicitovaných a kontrolních vzorcích téměř nevyskytoval. Nejvyšší hladina izoflavonoidů byla u suspenzní kultury naměřena v 48 hodině po působení elicitoru v...