Hladina autoprotilátek proti pro-katepsinu D v různých souborech pacientů

Abstract

VERONIKA PROKOPOVÁ HLADINA AUTOPROTILÁTEK PROTI PROKATHEPSINU D V RŮZNÝCH SOUBORECH PACIENTŮ ABSTRAKT Kathepsin D (E.C. 3.4.23.5, CD) je lysozomální aspartátová peptidasa syntetizovaná ve všech savčích buňkách a základní vlastností je schopnost katalyzovat hydrolytické štěpení peptidické vazby v peptidech nebo proteinech. V průběhu dlouholetého výzkumu bylo zjištěno, že v nádorových buňkách dochází ke zvýšené expresi CD, která je až 50krát vyšší než v normálních buňkách. Nádorovými buňkami je uvolňován pouze enzymaticky inaktivní zymogen prokathepsin D (pCD) s intaktním aktivačním peptidem (AP). Předpokládá se, že tento aktivační peptid je pravděpodobně zodpovědný za mitogenní aktivitu pCD v nádorových buňkách. U pacientů s nádorovým onemocněním často dochází k tvorbě protinádorové imunitní odpovědi proti nádorovým antigenům. Stanovení těchto autoprotilátek a analyzování rozpoznaných antigenů by mohlo být využito jako diagnostických či prognostických markerů. Cílem bylo ověření hypotézy, zda hladina autoprotilátek proti AP pCD může být použita pro diagnostické účely a to především jako nový tumorový marker. Proto bylo nutné vytvořit a optimalizovat imunoanalytickou metodu ELISA pro stanovení autoprotilátek proti AP pCD v séru vybraných skupin pacientů. Pro hladinu naměřených autoprotilátek byla provedena...

VERONIKA PROKOPOVÁ THE LEVEL OF AUTOANTIBODIES AGAINST PROCATHEPSIN D IN THE DIFFERENT SETS OF PATIENTS ABSTRACT Cathepsin D (E.C. 3.4.23.5, CD) is lysosomal aspartic peptidase syntetized in all of the mammal cells and the ability to catalyze the hydrolitic cleavage peptidic bonds in peptides or proteins belongs to its basis characteristic. During the long-standing research it was discovered, that there exist an increased expression of CD in tumorous cells, which is more than 50 times higher than in normal cells and which leads to secretion of CD from these cells. Only enzymatically inactive zymogen procathepsin D (pCD) with intact activation peptide (AP) attached is being released by the tumorous cells. It was shown, that this activation peptide is probably responsible for the mitogenic activity in the tumorous cells. It comes up very often to the creation of antitumor immune response against tumor antigens at patients suffering from tumorous condition. Determination of these autoantibodies and analysing of diagnosed antigens could employed as diagnostic and prognostic markers. The aim of our study was to verify the hypothesis, that the level of autoantibodies against AP pCD could be employed for diagnostic purposes, first of all as a new tumorous marker. It was necessary to develop and optimalize ELISA...