Vliv hypoxie na embryonální vývoj myokardu a koronárního řečiště

Abstract

Naše studie měla ověřit, jak hypoxie ovlivňuje tvorbu koronárního řečiště a vývoj myokardu a vysvětlit letalitu embryí. Předchozí experimenty totiž za hypoxických podmínek prokazovaly dilataci srdečních komor a zvýšenou úmrtnost embryí se známkami srdečního selhání. Jako experimentální model byla použita embrya japonské křepelky (Coturnix coturnix japonica). Vejce byla inkubována za hypoxických podmínek (16% O2). Kontrolní skupina byla inkubována stejný čas v normoxických podmínkách (21% O2). Vliv hypoxie byl hodnocen 5.-9. den embryonálního vývoje. Koronární řečiště jsme znázorňovali nástřikem tuší. Proliferaci buněk v myokardu jsme sledovali značením pomocí BrdU. Pro histologickou analýzu jsme použili značení standartní barvení hematoxilinem a eosinem. K další analýze jsme použili imunohistochemický průkaz protilátkami proti sarkomerickému aktinu (marker kardiomyocytů) a/nebo aktinu hladké svaloviny. Jako marker tkáňové hypoxie byla použita Hypoxyprobe 1, která značí hypoxické okrsky. Cévní systém jsme znázorňovali v řezech protilátkou QH1, která je specifická pro endotelové buňky křepelky. Vystavení křepelčích vajec hypoxickým podmínkám znamená snížení přežití. Nejdelší doba přežití u hypoxických embryí byla devět dnů. V srdcích embryí vyvíjejících se za normoxických podmínek jsou přítomné hypoxické...

Human, as all multicelullar organisms, is dependant on oxygen availability. Hypoxia is a stimulus which must the organism adapt from early development. In prenatal life fundaments of circulation originate separately and first than they interconnect in complete system of vessel tubes incorporating heart. Haemodynamic - as one of the factors - soon takes part in vessels system development. Restricted blood flow results in vascular bed regression; on the contrary higher flow promotes its development in prenatal life as well as in adulthood. The aim of our study was to investigate the effect of hypoxia on coronary arterial tree formation and myocardial development and to explain embryonic lethality. Previous studies found ventricular dilatation and increased mortality with signs of heart failure. We used quail embryos (Coturnix coturnix japonica). Eggs were incubated under hypoxic conditions (16% O2). Controls were incubated in normal oxygen tension (21% O2). The effect of hypoxia was analyzed 5 - 9 day of embryo development. Coronary system was visualized by injecting Indian ink. Proliferation was measured using BrdU labelling. For histological analysis we used standard haematoxylin and eosin labelling. For further analysis we used immunohistochemical staining with antibodies against sarcomeric actin...