Detekce cytokeratinů ve zdravé rohovce a spojivce ( Studie je součástí výzkumu hodnotícího změny a význam exprese cytokeratinů při různých typech onemocnění rohovky a spojivk

Abstract

Cílem této práce byla imunohistochemická charakterizace výskytu cytokeratinů 1 až 20 ve zdravé lidské rohovce, limbu a spojivce. Dalším cílem této práce bylo zjistit, zda přítomnost cytokeratinů 7 může být márkrem deficience limbálních kmenových buněk. Pomocí nepřímé fluorescenční imunohistochemie na kryořezech byl detekován výskyt cytokeratinů v jednotlivých vrstvách kontrolní rohovky, limbu a spojivky. Nepřímou fluorescenční imunohistochemií na membránách Millicell byl sledován výskyt cytokeratinů 7 na povrchu epitelu zdravé rohovky a spojivky a epitelu rohovky a spojivky získaných od pacientů s deficiencí limbálních kmenových buněk. V epitelu rohovky byla prokázána přítomnost pro rohovku specifického cytokeratinů 3/12, dále jsme detekovali cytokeratiny charakteristické pro jednoduchý epitel (cytokeratiny 8, 18, 19), pro vrstevnatý epitel (cytokeratiny 4, 5, 13, 14), charakteristické pro hyperproliferaci (cytokeratin 16). V epitelu limbu se nacházely cytokeratiny charakteristické pro jednoduchý epitel (cytokeratiny 8, 18, 19), pro vrstevnatý epitel (cytokeratiny 4, 5, 13, 14, 15) a pro rohovku specifický cytokeratin 3/12. V epitelu spojivky byly pozitivní cytokeratiny charakteristické pro jednoduchý epitel (cytokeratiny 7, 8, 18, 19), pro vrstevnatý epitel (cytokeratiny 4, 5, 13, 14, 15), dále jsme...

Purpose: The aim of this work was to characterize the spectrum of cytokeratin 1 - 20 expression in healthy cornea, limbus and conjunctiva. The next aim was to determine whether the expression of cytokeratin 7 can be a marker of limbal stem cell deficiency. Materials and methods: The spectrum of cytokeratins was studied using immunofluorescent staining of cryosections from healthy cornea, limbus and conjunctiva. The expression of cytokeratin 7 was detected by immunofluorescent staining on Millicell membranes. The epithelium of healthy cornea and conjunctiva and the epithelium of the cornea and conjunctiva of patients suffering from limbal stem cell deficiency were assessed. Results: The typical corneal cytokeratin 3/12 was present in the corneal epithelium. Cytokeratins characteristic of simple epithelium (cytokeratins 8, 18, 19), stratified epithelium (cytokeratins 4, 5, 13, 14) and hyperproliferation (cytokeratin 16) were also present in the human cornea. The limbal epithelium was positive for cytokeratins characteristic of simple epithelium (cytokeratins 8, 18, 19), stratified epithelium (cytokeratins 4, 5, 13, 14, 15) and the cornea-specific cytokeratin 3/12. The conjunctival epithelium showed immunostaining for cytokeratins characteristic of simple epithelium (cytokeratins 7, 8, 18, 19), stratified...