Optimization of separation conditions for HPCCC of paclitaxel

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a analýzy léčiv Kandidát: Šárka Havrlantová Konzultant: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Název diplomové práce: Optimizace separačních podmínek HPCCC pro paclitaxel Cílem této práce základního výzkumu je seznámit se s problematikou izolace přírodních látek, v našem případě paclitaxelem a jeho meziproduktů (především 10-deacetylbaccatinem) pomocí vysoce moderní techniky vysoce účinné protiproudé chromatografie (HPCCC). Pro účely testování separace je nutné prakticky vyzkoušet možné mobilní a stacionární fáze složené z různých rozpouštědel a jejich poměrů. Protiproudá ("countercurrent") chromatografie patří mezi moderní separační techniky techniky využívající dvě vzájemně nemísitelné kapaliny.. Jedna z kapalin zastupuje fázi stacionární, druhá mobilní. Stacionární fáze je držena v koloně pomocí odstředivé síly zatímco mobilní fáze je pumpována skrz kolonu. Nastříknutý vzorek tak prochází spolu s mobilní fází přes kolonu a podle svého distribučního koeficientu jsou jednotlivé komponenty drženy na stacionární fázi nebo prochází dále přes detektor do sběrače frakcí. Výhodou této nedestruktivní metody je například možnost analyzovat větší množství vzorku, práce při vyšších průtocích s čímž souvisí kratší doba analýzy...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate: Šárka Havrlantová Supervisor: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Name of diploma thesis: Optimization of separation conditions for HPCCC of paclitaxel The aim of this work is a feasibility study of natural substances isolation (in my case it is paclitaxel and its intermediate 10-deacetylbaccatin) using modern technique called High performance countercurrent chromatography (HPCCC) available in Teva in Opava. For this basic research it was necessary to study the literature and test various solvent systems. Chosen solvent systems were then tested together with natural substance in HPCCC, results were processed and discussed. Countercurrent chromatography is considered a modern separation technique based on two immiscible liquids. One of them is called a stationary phase and is held inside the column by centrifugal force, the second liquid is called a mobile phase and is pumped through the column. Then the injected liquid sample is also pumped through the column and depending on distribution coefficients the sample components are either held in the stationary phase or pass through the column and detector into fraction collector. Advantages of this method are e.g. total...