Vliv monoterpenu citralu na expresi detoxikačních enzymů v HepaRG buňkách

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Uchazeč: Bc. Tereza Švábová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Michaela Šadibolová Název diplomové práce: Vliv monoterpenu citralu na expresi detoxikačních enzymů v HepaRG buňkách Citral je acyklický monoterpen, který je produkován především vyššími rostlinami. Je jedním z mnoha sekundárních metabolitů, které slouží rostlině jako detoxikační faktory, morforegulátory, atraktanty pro opylovače nebo obranné látky. Mimo jiné má řadu pozitivních účinků např. antibakteriální, protizánětlivé nebo protinádorové, ale při nesprávném použití může být toxický, zejména pro játra. Cílem této diplomové práce bylo zjistit účinek citralu na vybrané biotransformační a antioxidační enzymy v HepaRG buňkách. Diferencované HepaRG buňky byly inkubovány s 10 μM rifampicinem, 10 μM β-naftoflavonem, 30 μM oltiprazem, 10 μM citralem, 30 μM citralem a 100 μM citralem 12 a 24 hodin pro stanovení exprese mRNA a 24 a 48 hodin pro stanovení proteinové exprese. Na úrovni mRNA rifampicin indukoval CYP3A4 při 12 i 24hodinové inkubaci, β-naftoflavon indukoval CYP1A2 při 12 i 24hodinové inkubaci a aldo-ketoreduktasu (AKR1C) při 24hodinové inkubaci, oltipraz indukoval glutathionperoxidasu (GPX1) při 12 i 24hodinové inkubaci. Po...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Tereza Švábová Supervisor: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Consultant: Mgr. Michaela Šadibolová Title of diploma thesis: Effect of monoterpene citral on the expression of detoxification enzymes in HepaRG cells Citral is an acyclic monoterpene, which is mainly produced by higher plants. It is one of the many secondary metabolites, which serve the plant as detoxifying factors, morphoregulators and attractants for pollinators or defense substances. Besides other things, it has numerou positive effects such as antibacterial, anti-inflammatory or antitumor, but it may be toxic, especially for the liver, if used incorrectly. The main goal of this thesis was to find out the effect of citral on selected biotransformation and antioxidant enzymes in HepaRG cells. Differentiated HepaRG cells were incubated with 10 µM rifampicin, 10 µM β-naphthoflavone, 30 µM oltipraz, 10 µM citral, 30 µM citral and 100 µM citral for mRNA expression detection for 12 and 24 hours and for protein expression evaluation for 24 and 48 hours. At the mRNA level, rifampicin induced CYP3A4 at 12- and 24-h incubation, β-naphthoflavone induced CYP1A2 at 12- and 24-h incubation and aldo-ketoreductase (AKR1C) at 24-h incubation,...