Transportní mechanismy sekundárních metabolitů přes membrány rostlinných buněk

Abstract

Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova Katedra farmakognosie Kandidát: Mgr. Jan Kubeš Školitel: PharmDr. Lenka Tůmová, CSc. Název disertační práce: Transportní mechanismy sekundárních metabolitů přes membrány rostlinných buněk V rámci studia metabolismu isoflavonů byla pozornost zaměřena na způsob jejich transportu v rostlinách nebo in vitro kulturách. Tento výzkum zahrnuje identifikaci mechanismu přenosu přes membrány buněk nebo vakuol, který se odehrává pomocí transportních proteinů nebo vezikul. Přenos pěti isoflavonů (genistin, genistein, biochanin A, daidzein a formononetin) do živného media byl sledován u suspenzních kultur Trifolium pratense L. a Genista tinctoria L. Po aplikaci roztoků NH4VO3 (1 a 10M koncentrace) došlo u G. tinctoria a T. pratense po 24 hodinách k zvýšení obsahu isoflavonů v živném mediu. Tento nárůst byl inhibován látkami, které ovlivňují aktivitu různých transportních mechanismů. Na koncentraci většiny isoflavonů v mediu s kulturou T. pratense působily převážně látky inhibující ABC proteiny z podskupiny MRP, kdy obsah genisteinu byl spíše ovlivněn MDR inhibitory. Na přítomnost isoflavonů v mediu také negativně působil brefeldin A, který inhibuje vesikulární transport. V sušině byl poté pozorován vzestup obsahu některých těchto isoflavonů. U kultury...

Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Charles University Department of pharmacognosy Candidate: Mgr. Jan Kubeš Supervisor: PharmDr. Lenka Tůmová, CSc. Title of Doctoral thesis: Transport mechanisms of secondary metabolites across membranes of plant cells An attention was focused on the metabolism of isoflavones in recent years, including their transport within plants and cultures in vitro. A research is focused on the transport mechanism identification across cell or vacuolar membrane. There are localized different transporters as or the transport of some metabolites can take place through membrane vesicules. The release of five isoflavones (genistin, genistein, biochanin A, daidzein and formononetin) into nutrient medium was observed in suspension culture of Genista tinctoria L and Trifolium pratense L. These cultures were treated with NH4VO3 solutions (1 a 10 M concentration) when isoflavon content in medium was higher after 24 hours. This increased volume of isoflavones was supressed by different transport mechanism inhibitors. The transport of isoflavones in T. pratense was influenced by ABC inhibitors from MRP subfamily, but genistein concentration in medium was lower after treatment with MDR subfamily inhibitors. Brefeldin A, which blocks vesicular transport, also decreased concentration of...