In vitro testovanie cytotoxicity a hematotoxicity vyvíjaných liečiv

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology & Toxicology Student: Anna Ďurinová Supervisor: PharmDr. Lucie Hyršová, PhD. Title of diploma thesis: In vitro testing of cytotoxicity and hematotoxicity of drugs in development Preclinical drug evaluation is an important stage in development of new drug, it describes testing substances before they may be carried out in humans. This work is focused on the experimental measurement of cytotoxicity and hematotoxicity, which are parts of preclinical research. In vitro cytotoxicity tests are one of the first methods used for investigating novel drugs. Viability was monitored in the HepG2 model cell line. The viability evaluation was performed by obtaining parameter IC50, the concentration of substance at which half of the cultured cells lose their viability. We studied the stability of rat red blood cells after administration of the tested substances, so we observed in vitro hemolysis, which is a good indicator of substances effect and safety. The EC50 value is monitored to determine the hemolytic effect. The EC50 concentration causes a hemolytic effect on 50% of tested erythrocytes. The no observed effective concentration parameter was also observed, when the 10% limit of positive control's hemolytic activity was not...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Anna Ďurinová Školiteľ: PharmDr. Lucie Hyršová, Ph.D. Názov diplomové práce: In vitro testovanie cytotoxicity a hematotoxicity vyvíjaných liečiv Predklinické hodnotenie liečiv je dôležitou fázou zrodu nového lieku, popisuje testovania látok pred tým, ako sa podajú ľuďom. Táto práca sa zameriava na experimentálne meranie cytotoxicity a hematotoxicity, ktoré sú dôležitými súčasťami predklinického výskumu. Testy in vitro cytoxicity predstavujú jednu zo vstupných metód skúmania budúcich liekov. Viabilita, živitaschopnosť, bola sledovaná na modelovej bunkovej línii HepG2. Hodnotenie viability bolo prevádzané získaním parametru IC50, tj. koncentrácie látky, pri ktorom stráca životnosť polovica kultivovaných buniek. Ďalej bola študována stabilita červených krviniek potkanej krvi po podaní testovaných látok, čiže bola pozorovaná in vitro hemolýza, ktorá je dobrým ukazovateľom efektu a bezpečnosti látok. Pri stanovovaní hemolytického efektu sa sleduje hodnota EC50, ktorá spôsobí hemolytický účinok na 50 % skúšaných erytrocytoch. Taktiež boli pozorované najvyššie koncentrácie, ktoré nevyvolávali hemolytický účinok, teda kedy nedošlo k prekročeniu medze 10 % hemolytickej aktivity pozitívnej kontroly....