Vliv abiotických elicitorů na obsah sekundárních metabolitů v in vitro kulturách rostlin - I.

Abstract

Plants are a source of a wide range of secondary substances, which due to their effects find use in many areas of focus. By a method called elicitation, we can achieve their higher and thus more efficient production. This diploma thesis aimed to determine whether the abiotic elicitor 2-(4-chlorophenyl)-N-(5-chloropyridin-2-yl)acetamide can positively affect the production of the flavonoid hyperoside in callus and suspension culture of Hypericum perforatum L. The elicitor was added to the in vitro cultures in three concentrations: C1 = 3,571.10-3 mol/l; C2 = 3,571.10-4 mol/l and C3 = 3,571.10-5 mol/l. A sample was taken at regular intervals after 6, 24, 48, 72 and 168 hours of elicitor treatment. Control samples were taken after 24 and 168 hours. The content of hyperoside produced was subsequently determined using High Performance Liquid Chromatography. Simultaneously, the amount of hyperoside released into the nutrient media of both plant cultures was also monitored. Maximum hyperoside production was recorded in suspension culture after 6 (17,7 µg/g DW) and 48 hours (3,69 µg/g DW) of elicitor treatment with the lowest concentration of C3 (3,571.10-5 mol/l). The content of hyperoside in the first case was 1770 % higher compared to the control sample. There was a significant release of hyperoside...

Rostliny jsou zdrojem široké škály sekundárních látek, které díky svým účinkům nachází využití v mnoha oblastech zaměření. Metodou nazývanou elicitace můžeme dosáhnout jejich vyšší a tím i efektivnější produkce. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, zda abiotický elicitor 2-(4-chlorfenyl)-N-(5-chlorpyridin-2-yl)acetamid může pozitivně ovlivnit produkci flavonoidu hyperosidu v kalusové a suspenzní kultuře Hypericum perforatum L. Ke kulturám in vitro byl elicitor přidáván ve třech koncentracích: C1 = 3,571.10-3 mol/l; C2 = 3,571.10-4 mol/l a C3 = 3,571.10-5 mol/l. V pravidelných časových intervalech byl po 6, 24, 48, 72 a 168 hodinách působení elicitoru odebrán vzorek. Odběr kontrolních vzorků byl proveden po 24 a 168 hodinách. Obsah vyprodukovaného hyperosidu byl následně stanoven za využití vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Současně bylo sledováno také množství uvolněného hyperosidu do živných médií obou rostlinných kultur. Maximální produkce hyperosidu byla zaznamenána v suspenzní kultuře po 6 (17,7 µg/g DW) a 48 hodinách (3,69 µg/g DW) působení elicitoru o nejnižší koncentraci C3 (3,571.10-5 mol/l). Obsah hyperosidu v prvním případě činil o 1770 % více v porovnání s kontrolním vzorkem. V kalusových kulturách docházelo k významnému uvolnění množství hyperosidu do živného média, kdy...