Sledovanie zmeny expresie vybraných ukazovateľov u glukózou indukované endotelové dysfunkcie in vitro.

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Názov diplomovej práce: Sledovanie zmeny expresie vybraných ukazovateľov u glukózou indukované endotelové dysfunkcie in vitro. Autor: Alexandra Hudecová Vedúci diplomovej práce: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce bolo zistiť, či nová monoklonálna protilátka carotuximab ovplyvňuje expresiu endoglínu a ďalších biomarkerov endotelovej dysfunkcie (eNOS, ICAM-1, VCAM-1, E-selektín), u ľudských aortálnych endotelových buniek, ktoré boli vystavené pôsobeniu vysokej hladiny glukózy. Metódy: Ľudské aortálne endotelové bunky (HAEC) boli po dobu 72 hodín vystavené pôsobeniu vysokej hladiny glukózy (45 mmol) a po dobu 12 hodín pôsobeniu carotuximabu (300 μg/ml). Pomocou real-time PCR sme zmerali génovú expresiu endoglínu, eNOS, ICAM-1, VCAM-1, E-selektínu. Metódou prietokovej cytometrie sme zmerali proteínové hladiny endoglínu a ICAM-1. Výsledky: Génová expresia endoglínu a všetkých biomarkerov endotelovej dysfunkcie bola po pôsobení vysokej glukózy signifikantne zvýšená. Po pridaní carotuximabu k vysokej glukóze došlo k signifikantnému zvýšeniu génovej expresie u eNOS, zatiaľ čo u endoglínu ani ostatných markerov endotelovej dysfunkcie nebol zaznamenaný signifikantný...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Monitoring the change in expression of selected indicators in the glucose induced endothelial dysfunction in vitro. Author: Alexandra Hudecová Supervisor of Diploma Thesis: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Background: The aim of this diploma thesis was to determine, whether the new monoclonal antibody carotuximab affects the expression of endoglin and other biomarkers of endothelial dysfunction (eNOS, ICAM-1, VCAM-1, E-selectin) in human aortic endothelial cells exposed to high glucose. Methods: Human aortic endothelial cells (HAEC) were exposed to high glucose levels (45 mmol) for 72 hours and carotuximab (300 µg/ml) for 12 hours. We measured the gene expression of endoglin, eNOS, ICAM-1, VCAM-1, E-selectin by real-time PCR. We measured endoglin and ICAM-1 protein levels by flow cytometry. Results: Gene expression of endoglin and all biomarkers of endothelial dysfunction was significantly increased after high glucose. After the addition of carotuximab to high glucose, we observed a significant increase in gene expression of eNOS, while no significant difference was measured in endoglin or other markers of endothelial dysfunction. Protein levels of endoglin were...