Vliv délky fixace a typu fixačního roztoku na imunohistochemickou analýzu při detekci kmenových buněk ve tkáni endometria.

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv délky fixace a typu fixačního roztoku na imunohistochemickou analýzu při detekci kmenových buněk ve tkáni endometria Autor: Bc. Dominika Macháčová Vedoucí diplomové práce: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cíle: Cílem této práce je zjistit, jak typ fixačního roztoku a délka fixace ovlivňuje imunohistochemii. Materiály a metody: Do této studie bylo zahrnuto celkem pět prasečích a pět kravských endometrií pocházejích z resekátů hysterektomie. Zjišťována byla imunohistochemická exprese progesteronových receptorů a SOX2 ve tkáních endometria fixovaných v pěti fixačních roztocích (Formol, Antigenfix, Greenfix, Bouin, Methacarn) po 1,5; 8,5; 15,5; 29,5; 64,5 a 189,5 dnech fixace. Imunohistochemické barvení bylo provedeno na barvícím automatu Ventana Benchmark ULTRA. Výsledky: Imunohistochemická exprese progesteronových receptorů byla po 1,5 - 64,5 dnech fixace formolem prokázána u 92-87 % žlázových buněk a u 59 % buněk po 189,5 dnech fixace. Intenzita reakce byla hodnocena jako silná, po 189,5 dnech klesla na slabou. U tkání fixovaných Antigenfixem byla pozorována silná exprese progesteronových receptorů u 96,4 % žlázových buněk po 1,5 dni fixace, u 77 % buněk po 29,5 dnech...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Influence of fixation time and type of fixative solution on immunohistochemical analysis in the detection of stem cells in endometrial tissue Author: Bc. Dominika Macháčová Supervisor of Diploma Thesis: prof. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Backgroud: The aim of this diploma thesis was to investigate the effect of the type of fixative solution and the length of fixation on immunohistochemistry. Materials and methods: A total of five porcine and five bovine endometria obtained from hysterectomy specimens were included in this study. Immunohistochemical staining with progesterone receptors and SOX2 in endometrium fixed in five fixative solutions (Formol, Antigenfix, Greenfix, Bouin, Methacarn) were performed after 1,5; 8,5; 15,5; 29,5; 64,5 and 189,5 days of fixation. An automated immunostainer Ventana Benchmark Ultra was used for all immunohistochemical analysis. Results: Expression of progesterone receptors was demonstrated in 92-87 % of glandular cells after 1,5-64,5 days and in 59 % of cells after 189,5 days of formalin fixation. The intensity of staining was strong, but after 189,5 days it was evaluated as being weak. In Antigenfix-fixed tissues, strong progesterone...