Vývoj metody on-line extrakce na tuhé fázi pomocí průtokových metod

Abstract

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical chemistry Candidate: Bc. Jan Vinklárek Supervisor: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Title of the diploma thesis: Development of on-line solid phase extraction using flow methods The goal of this diploma thesis was to create and validate method using combination of SPE extraction and flow methods (in this case method SIA). Creatinine was chosen as extracted analyte and urine was chosen as biological material. At first, the method was optimized (concentration and flow rate of wash reagent and flow rate of sample and standards). Then the limits of the created method were tested. Finally, the trueness and repeatability of results was tested and also stability of diluted samples. All of these tests (in thesis named experiments) had good results. Final parameters of method are: Sorbent - SPH Iontosorb 100 Wash reagent - 50% acetonitrile, aspirated 0,5 ml Elute reagent - 1% water solution of ammonia hydroxide, aspirated 0,5 ml Sample diluted by acetic acid with pH 2,4, aspirated 20 µl, or 10 µl according to sample concentration (method alone makes decision about changing aspirated volume, decision algorithm is in the program) Method of standard adding is used for measuring creatinine concentration in...

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Jan Vinklárek Školitel: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj metody on-line extrakce na tuhé fázi pomocí průtokových metod Cílem předložené diplomové práce bylo vyvinout a optimalizovat metodu využívající spojení extrakce na tuhé fázi a průtokových metod. Extrahovaným analytem byl zvolen kreatinin a biologickým materiálem moč. V prvním kroku se metoda nejprve optimalizovala (koncentrace a průtok promývacího činidla, průtok vzorku a standardu). Poté se testovala robustnost metody, a nakonec její správnost a opakovatelnost, dále se testovala i stabilita naředěných vzorků. Všechny tyto testy dopadly dobře a podařilo se metodu optimalizovat. Finální parametry metody jsou následující: Sorbent - SPH Iontosorb 100 Promývací činidlo - 50% acetonitril, nasáváno 0,5 ml Eluční činidlo - 1% vodný roztok hydroxidu amonného, nasáváno 0,5 ml Vzorek ředěný kyselinou octovou o pH 2,4, nasáváno 20 µl, nebo 10 µl podle koncentrace vzorku (rozhodnutí o změně nasávaného objemu metoda provede sama, v programu je rozhodovací algoritmus) Pro zjištění koncentrace vzorku je používaná metoda standardního přídavku. Používá se standard o koncentraci 2mg/l v nástřicích 0, 10, 20 µl. Vzorky se měří v...