Vliv vybraných cytostatit na aktivitu cytosolických reduktas karbonylové skupiny v MCF-7 linii

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Titul, jméno, příjmení kandidáta: Lenka Vildová Titul, jméno, příjmení školitele: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Titul, jméno, příjmení školitele specialisty: Mgr. Martina Gavelová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných cytostatik na aktivitu cytosolických reduktas karbonylové skupiny v MCF-7 linii Nádorová rezistence představuje hlavní problém chemoterapeutické léčby rakoviny. Jednou z možných příčin vzniku rezistence může být zvýšení enzymatické inaktivace cytostatik. V této studii jsme se zabývali vlivem antracyklinového antibiotika doxorubicinu a potenciálního cytostatika oracinu na aktivitu a expresi reduktas karbonylu v cytosolu buněk MCF-7 linie izolované z lidského adenokarcinomu prsu. Tato cytostatika jsou biotransformována cestou redukce karbonylové skupiny na méně účinné metabolity. Zjistili jsme, že po krátké (48hod) expozici nízkým (nM) koncentracím vybraných cytostatik dochází ke statisticky výraznému nárůstu aktivity reduktas v cytosolu buněk. Dále jsme se pokusili s využitím specifických inhibitorů definovat účast aldo-ketoreduktasy 1C3 (AKR1C3) a karbonylreduktasy 1 (CBR1) na redukci výše uvedených cytostatik. Zvolené enzymy se přirozeně exprimují v prsní tkáni. Z naměřených výsledků...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Title, Name, Surname of candidate: Lenka Vildová Title, Name, Surname of tutor: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Title, Name, Surname of tutor-specialist: Mgr. Martina Gavelová, Ph.D. Title of a diploma work: Influence of selected cytostatic drugs on activity of cytosolic carbonyl reducing enzymes in MCF-7 cell line A major problem in cytostatic treatment of malignant tumors is the development of drug-resistance. One of the potential mechanisms of resistance is induction of drug-inactivating enzymes. The aim of the present study was to evaluate the effects of short-term exposure of MCF-7 cells to doxorubicin and oracin on the activities and expression of selected carbonyl reducing enzymes. Carbonyl reduction of these cytostatic drugs leads to 13-doxorubicinol (doxol) and 11-dihydrooracin (DHO), the major metabolites with lower antineoplastic potency compared to the parent drugs. We found that short-term (48 h) exposure of MCF-7 cells to low (nM) concentrations of doxorubicin or oracin caused a significant elevation of both cytostatics reduction rates. In order to identify principal enzyme(s) catalyzing the reduction of doxorubicin and oracin, we tested effects of selected inhibitors of aldo-keto reductase...