Studium transportních mechanismů pro xenobiotika

Abstract

Cíl: Diplomová práce byla zaměřena na využití izolovaných potkaních ledvinných buněk ke studiu transportních mechanizmů vybraných receptorově specifických peptidů ze skupiny analogů somatostatinu značených vhodnými radionuklidy - 111In-DOTA-oktreotátu a 125IDOTA- oktreotátu. Byl proveden pokus s vybranými modelovými látkami sacharózou a metylglukózou jako markerů pasivního a aktivního transportu. Průběh akumulace metylglukózy byl zkoušen v ledvinných a pankreatických buňkách. Dále byla studována akumulace radiopeptidů v přítomnosti potenciálních inhibitorů, které by mohly snížit retenci daných radiopeptidů a tím i klinicky nežádoucí radiotoxické poškození ledvin. Metody: Izolované ledvinné buňky potkana byly získány kolagenázovou metodou. Pankreatické exokrinní potkaní buňky byly získány z buněčné linie nádorových buněk. Životnost buněk byla zjištěna testem s trypanovou modří. Míra akumulace modelových látek byla porovnána s mírou akumulace daných radiopeptidů 111In-DOTA-oktreotátu a 125I- DOTAoktreotátu. Povaha transportu byla sledována i za nízkých teplot. Megalin/kubilinový membránový transportní systém byl studován pomocí jejich ligandů (např. albumin, gentamicin), které by kompeticí při transportu mohly inhibovat akumulaci zkoumaných radiopeptidů. Výsledky: Životnost buněk byla dostatečně...

Aim: Graduation theses was aimed on the use of the isolated rat renal cells to study of transport mechanisms of the selected receptor - specific peptides from the group of somatostatin analogues labeled with convenient radionuclides - 111In-DOTA-octreotate, 125IDOTA- octreotate. Experiment with the selected model substances - sucrose and α-methyl glucoside as markers of active and passive transport was executed. Accumulation process of α-methyl glucoside was tested in renal and pancreatic cells. Further, accumulation of the radiopeptides was researched in presence of the potential inhibitors, which could reduce to retention these radiopeptides and thus also clinically undesirable renal radiotoxic insult. Methods: Isolated rat renal cells were prepared by collagenase technique. Pancreatic rat exocrine cells were prepared from cell line tumor cells. Viability of cells was tested with trypane blue. The accumulation rate of model substances was compared with the accumulation radiopeptides rate: 111In-DOTA-octreotate, 125I-DOTA-octreotate. Transport character was also monitored for low temperatures. Megalin/cubilin membran transport system was researched via their ligands (e.g. albumin, gentamicin), which could inhibit accumulation of the radiopeptides by competition in transport. Results: Cells...