Studium úlohy biotransformačních enzymů v chemické karcinogenezi

Abstract

Biotransformační studie in vitro jsou nezbytnou součástí toxikologického výzkumu i vývoje nových léčiv, nebo umožňují významnou měrou snížit počet testů na lidských dobrovolnících a poskytují detailnější informace o metabolismu studované látky. Díky limitované dostupnosti lidské jaterní tkáně je pro studium interakcí biotransformačních enzymů s xenobiotiky třeba využívat alternativní modelové systémy a modelové zvířecí druhy. Vzhledem k tomu, že u nejběžnějšího laboratorního druhu, potkana, nejsou přítomny aktivity nejvýznamnějších lidských biotransformačních enzymů, velmi přínosné mohou být informace získané s použitím miniprasat jako modelového druhu. Rekombinantní lidské biotransformační enzymy exprimované v bakteriálních buňkách mohou být použity ke studiu biotransformace ve formě izolovaných bakteriálních membrán. Tyto systémy poskytují informace o metabolismu studované látky definovaným enzymem, jejich výhodou oproti izolovaným enzymům je přitom nízká cena a snadnější a rychlejší příprava s menšími ztrátami enzymové aktivity během izolace. Cílem práce bylo: 1) Připravit modelový systém s lidskými biotransformačními enzymy exprimovanými v bakteriálních membránách a porovnat vlastnosti tohoto systému s jaterními mikrosomy pokusných miniprasat. Zhodnotit možné využití těchto dvou systémů pro testování...

In vitro biotransformation studies are an integral part of both toxicological research and drug development. They allow for a significant reduction of tests on human volunteers and provide detailed information about the metabolism of a given compound. Due to limited availability of human liver tissue, it is necessary to make use of alternative model systems and model animal species in the study of the interactions between biotransformation enzymes and xenobiotics. Since the activities of the most important human biotransformation enzymes are absent in the most commonly used laboratory species, rat, information gained in experiments with minipigs is very valuable. Recombinant human biotransformation enzymes expressed in bacteria can be used in biotransformation studies in the form of isolated bacterial membranes. These model systems provide information about the metabolism of a given xenobiotic by a defined enzyme and thein advantages compared to purified enzymes include low cost and quicker and easier preparation with lower loss of enzymatic activity during isolation. The aims of this study were: 1) To prepare a model system with recombinant human biotransformation enzymes expressed in bacterial membranes and to compare the properties of this system with minipig liver microsomes. To assess the usefulness of...