Stanovení potenciálního cytotoxického působení experimentálních látek in vitro.

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Student: Barbora Osinková Supervisor: RNDr. Jana Maixnerová Ph.D. Title of diploma thesis: Determination of potential cytotoxic effect of experimental substances in vitro The subject of this master's thesis was to evaluate the cytotoxic potential of newly synthesized substances in vitro in the cell model HepG2, which is cell line obtained from a human liver carcinoma. These substances were synthesized within the Department of Organic and Bioorganic Chemistry at the Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Charles University (GUAM, GUAM-NH2, THIOSEMIK, GUAM-2, GUAM-6, GUAM- 11, GUAM-12, GUAM-18, GUAM-19, GUAM-2-1, GUAM-6-3). These substances are being investigated for assumed antimicrobial activity against G+ bacteria and fungi or for their ability to inhibit cholinesterases. The commercial colorimetric method CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay was used for in vitro determination of cytotoxicity, the principle of which is to measure the metabolic activity of cells based on the reduction of the tetrazolium salt of MTS to coloured formazan. The half-maximal inhibitory concentration IC50 was used to determine the number of viable cells and for evaluation of cytotoxic potential of...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Barbora Osinková Školitel: RNDr. Jana Maixnerová Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení potenciálního cytotoxického působení experimentálních látek in vitro Předmětem této diplomové práce bylo vyhodnocení cytotoxického potenciálu nově syntetizovaných látek in vitro na buněčném modelu HepG2, což je buněčná linie získaná z lidského jaterního karcinomu. Testované látky byly syntetizovány v rámci Univerzity Karlovy na Katedře organické a bioorganické chemie Farmaceutické fakulty v Hradci Králové (GUAM, GUAM-NH2, THIOSEMIK, GUAM-2, GUAM-6, GUAM- 11, GUAM-12, GUAM-18, GUAM-19, GUAM-2-1, GUAM-6-3). Tyto látky jsou zkoumány pro předpokládané antimikrobiální působení vůči G+ bakteriím a houbám nebo pro schopnost inhibovat cholinesterázy. Pro in vitro stanovení cytotoxicity bylo využito komerční kolorimetrické metody CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, jejíž principem je měření metabolické aktivity buněk na základě redukce tetrazoliové soli MTS na barevný formazan. Pro stanovení počtu životaschopných buněk a vyhodnocení cytotoxického potenciálu zkoumaných látek na HepG2 buněčnou linii bylo využito střední inhibiční koncentrace IC50. Získané hodnoty byly následně porovnávány s...