Histologické hodnocení chirurgických experimentů u zvířecích modelů

Abstract

Úvod: Dizertační práce je založena na šesti studiích, které se zaměřují na uplatnění kvantitativní histologie v hodnocení experimentů u zvířecích modelů. Zahrnuje představení postupů virtuální mikroskopie a strategií vzorkování obrazových polí, mapování změn mikroskopické struktury segmentů ovčích a prasečích krkavic a jejich porovnání s lidskými koronárními cévami a arteria thoracica interna, hodnocení vaskularizace u myšího modelu s xenografty lymfomů (PDX), vliv hyperbarické oxygenoterapie na tvorbu kolagenu typu III a na vaskularizaci v kožní ráně u Zucker Diabetic Fatty potkana. Metody: Přehledový článek o virtuální mikroskopii byl zaměřen na ukázku příkladu vzorkování snímků z různých oblastí kvantitativní histologie. V ostatních studiích byly histologicky zpracované řezy barvené škálou metod zaměřených na stavbu cévní stěny, a buněčné osídlení (orcein, pikrosiriová červeň, Verhoeffův hematoxylin a zelený trichrom, Gillův hematoxylin, alcianová modř) a imunohistochemickým průkazem antigenů (α-hladký svalový aktin, neurofilamentový protein, CD-31, von Willebrandův faktor). Pomocí nevychýleného vzorkování a stereologických metod jsme kvantifikovali plošné podíly složek (elastin, kolagen, hladkosvalový aktin a chondroitinsulfát) použitím stereologické bodové mřížky; dvourozměrnou hustotu...

Introduction: The dissertation is based on six studies that focus on the application of quantitative histology in animal model experiments. It includes a presentation of virtual microscopy procedures and image field sampling strategies, mapping changes in the microscopic structure of ovine and porcine carotid segments and their comparison with human coronary arteries and internal thoracic arteries, vascularization assessment in a mouse model of lymphoma xenografts (PDX), the effect of hyperbaric oxygen therapy on type III collagen production and on vascularization in a skin wound in a Zucker Diabetic Fatty rat. Methods: The review article about virtual microscopy was focused on an example of sampling images from various areas of quantitative histology. In other studies, histologically processed sections were stained with a variety of methods for vascular wall construction, cell infiltration (orcein, picrosirius red, Verhoeff's hematoxylin and green trichrome, Gill's hematoxylin, alcian blue) and immunohistochemical antigen detection (α-smooth muscle actin, neurofilament protein, CD-31, von Willebrand factor). Using unbiased sampling and stereological methods, we quantified the area fraction of components (elastin, collagen, smooth muscle actin and chondroitin sulfate) using a stereological grid...