Imunohistochemická analýza vlivu TRC105 na proces jaterni fibrózy

Abstract

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department: Department of Biological and Medicinal Sciences Studijní obor: Pharmacy Author: Veronika Hamerníková Supervisor: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Title of master thesis: Immunohistochemical analysis of TRC105 effects on the liver fibrosis The subject of this diploma thesis was the analysis of the expression of liver fibrosis biomarkers in mice liver. The aim of our work was to test the effect of the drug TRC105 (carotuximab) on a fibrotic liver model after 4 weeks of DDC (3,5-diethoxycarbonyl-1,4-dihydro-2,4,6-colidine) administration. Collagen deposition and expression of α-SMA, GFAP and endoglin were examined and compared. Animals were divided into 3 groups: control group (n=6), DDC group (n=6) and TRC105 group (n=6). The control group was fed a standard diet, while the DDC and the TRC105 groups were fed a diet with 0.1% DDC. Physiological solution was administered to the control and DDC groups while carotuximab was administered to the TRC105 group. The analysis of fibrosis biomarker expression was then performed on fixed liver sections. Collagen expression was evaluated by Picro-Sirius Red staining and α-SMA, GFAP and endoglin expression by immunohistochemistry with fluorescence imaging. Histological staining of collagen...

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Veronika Hamerníková Vedoucí diplomové práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Název práce: Imunohistochemická analýza vlivu TRC105 na proces jaterní fibrózy Diplomová práce se zabývá analýzou exprese biomarkerů jaterní fibrózy jater myší. Cílem práce bylo otestovat účinek léčiva TRC105 (carotuximab) na modelu fibrotizovaných jater po 4 týdenním podávání DDC (3,5-diethoxykarbonyl-1,4-dihydro-2,4,6-kolidin). Byla zkoumána a porovnávána depozice kolagenu a exprese α-SMA, GFAP a endoglinu. Zvířata byla v experimentu rozdělena do 3 skupin: kontrolní skupina (n=6), DDC skupina (n=6) a TRC105 skupina (n=6). Kontrolní skupina byla krmena standardní dietou, DDC a TRC105 skupině byl v dietě podáván 0,1% DDC. Kontrolní a DDC skupině byl aplikován fyziologický roztok, skupině TRC105 bylo aplikováno léčivo. Analýza exprese pak byla prováděna na fixovaných jaterních řezech. Exprese kolagenu byla vyhodnocena barvením Picro-Sirius Red a exprese α-SMA, GFAP a endoglinu metodou imunohistochemie ve fluorescenčním zobrazení. Histologické barvení kolagenních vláken Picro-Sirius Red ukazuje, že DDC dieta vyvolává rozvoj jaterní fibrózy. Větší intenzita zabarvení v porovnání s...