Vývoj UHPLC-MS/MS a UHPSFC-MS/MS metod pro stanovení vybraných ochratoxinů

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Kristián Kretek Supervisor: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of the diploma thesis: Development of UHPLC-MS/MS and UHPSFC-MS/MS methods for determination of selected ochratoxins The purpose of this work was development and comparison of UHPLC and UHPSFC analytical methods coupled to tandem mass spectrometry for four common ochratoxins. The experiments were performed using UHPLC system ACQUITY UPLC and UHPSFC system ACQUITY UPC2, mass spectrometer XEVO TQ-XS was the same in both cases. First, optimization of ion source parameters and SRM transitions was done. For UHPLC along with ACN, 3 additives of the water-based component of mobile phase were tested - formic, acetic acid and ammonia, with flow rate 0,4 ml/min, gradient from 2 % to 95 % ACN in 5th minute, temperature 40řC and column Acquity UPLC BEH C18. For UHPSFC 6 organic modifiers along with CO2 were tested: MeOH and MeOH with addition of water, formic acid, ammonia, and ammonium formate, with flowrate 1,5 ml/min, gradient from 2 % to 45 % MeOH in 5th minute, temperature 40řC and BPR pressure 2000 psi. Screening of 13 columns was also conducted. Optimization of MS detection in SFC was done by testing 8 make-up solvents: MeOH, EtOH,...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kristián Kretek Školitel: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS a UHPSFC-MS/MS metod pro stanovení vybraných ochratoxinů Účel této práce spočíval ve vývoji a srovnání UHPLC a UHPSFC analytické metody ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií pro čtyři běžné ochratoxiny. Experimenty byly provedeny na UHPLC systému ACQUITY UPLC a UHPSFC systému ACQUITY UPC2, hmotnostní spektrometr XEVO TQ-XS byl totožný. Na počátku byla provedena optimalizace parametrů iontového zdroje a SRM přechodů. Pro UHPLC byly testovány ve směsi s ACN 3 vodné složky mobilní fáze - kyselina mravenčí, octová a amoniak, při průtoku 0,4 ml/min, gradientové eluci od 2 % do 95 % ACN v 5. minutě, teplotě 40 řC a koloně Acquity UPLC BEH C18. Pro UHPSFC bylo testováno ve směsi s CO2 celkem 6 organických modifikátorů: MeOH a MeOH s vodou, kyselinou mravenčí, amoniakem a mravenčanem amonným, při průtoku 1,5 ml/min, gradientové eluci od 2 % do 45 % MeOH v 5. minutě, teplotě 40 řC a tlaku 2000 psi. Dále byl proveden screening 13 kolon. Optimalizace hmotnostní detekce byla provedena v SFC testováním 8 přídavných kapalin: MeOH, EtOH a MeOH s přídavkem vody, kyseliny mravenčí, amoniaku a mravenčanu a...