Sekvenčná injekčná chromatografia - pokročilé a dvojdimenzionálne separácie

Abstract

Department: Department of analytical chemistry Candidate: Matej Gužiňák Supervisor: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Title of the diploma thesis: Sequential injection chromatography - advanced and two- dimensional separations The subject of this work was the development of two analytical methods intended for separating substances contained in silymarin, their comparison and preparing a template in the Microsoft Excel program to simplify data evaluation. In the first developed method, called classical sequential injection chromatography (1D- SIC), a long Ascentis® Express F5 chromatography column (10 cm x 4.6 mm, 5 µm) with an opti-guard® C18 pre-column (1 mm) was used during analysis. The mobile phase consisted of a mixture of acetonitrile with phosphoric acid solution with pH 2.0 prepared in a ratio of 27:73. The isocratic mode was chosen for the analysis; the total length was 16.3 minutes with a flow rate of 5 μL/s. In the second developed method, called two-dimensional sequential injection chromatography (2D-SIC), a Kinetex® 5 µm EVO C18 column (30 x 3.0 mm) with an opti- guard® C18 pre-column (1 mm) was chosen for the first dimension. In the second dimension, an Ascentis® Express F5 column (30 mm x 4.6 mm, 2.7 µm) was used. The analysis mode was chosen isocratic with a total length of 35.3...

Katedra: Katedra analytickej chémie Kandidát: Matej Gužiňák Školiteľ: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Názov diplomovej práce: Sekvenčná injekčná chromatografia - pokročilé a dvojdimenzionálne separácie Predmetom tejto práce bol vývoj dvoch analytických metód určených na separáciu látok obsiahnutých v silymaríne, ich porovnanie a príprava šablóny v programe Microsoft Excel na zjednodušenie vyhodnocovania dát. U prvej vyvinutej metódy, s názvom klasická sekvenčná injekčná chromatografia (1D-SIC), bola v priebehu analýzy použitá dlhá chromatografická kolóna Ascentis® Express F5 (10 cm x 4,6 mm, 5 µm) a predkolóna opti-guard® C18 (1mm). Mobilnú fázu tvorila zmes acetonitrilu s roztokom kyseliny fosforečnej s pH 2,0 pripravená v pomere 27:73. Pre analýzu bol zvolený izokratický režim, celková dĺžka bola 16,3 minút s prietokovou rýchlosťou 5 μL/s. U druhej vyvinutej metódy, s názvom dvojdimenzionálna sekvenčná injekčná chromatografia (2D-SIC), bola pre prvú dimenziu zvolená kolóna Kinetex® 5 µm EVO C18 (30 x 3,0 mm) s predkolónou opti-guard® C18 (1mm). V druhej dimenzií bola použitá kolóna Ascentis® Express F5 (30 mm x 4,6 mm, 2,7 µm). Režim analýzy bol zvolený izokratický o celkovej dĺžke 35,3 minút s prietokovou rýchlosťou 10 μL/s. Ako mobilná fáza bola použitá zmes acetonitrilu s roztokom...