Vývoj LC-MS metody pro stanovení vybraných endokrinních disruptorů

Abstract

Charles University Phaculty od Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate: Eliška Chvalkovská Supervisor: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Consultant: Mgr. Martin Novák Title of thesis: Development of LC-MS method for determination of selected endocrine disruptors The thesis is focused on the development and optimization of LC-MS method for the determination of twelve endocrine disruptors in amniotic fluid of pregnant women in the third trimestr of pregnancy. There is a suspision that premature births are connected with an increased incidence of endocrine disruptors in amniotic fluid. The analytes were extracted by liquid-liqud extraction with 4-methylpentan-2- on. The analytical method is based on using reverse phase high-performance liquid chromatography with Hypersil C4 GOLD column (2.1 × 100 mm, particles 1.9 µm). For analysis the gradient elution with the mobile phase A (0.5% (v/v) formic acid aqueous solution) and B (0.5% (v/v) formic acid solution in acetonitrile) at a flow rate of 0.5 ml/min, injection 5 µl and column oven temperature 35 řC was used. The high- resolution mass spectrometer Orbitrap Q Exative Plus with atmospheric pressure chemical ionization in positive mode was used to identify and determine the response of...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Eliška Chvalkovská Vedoucí diplomové práce: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Konzultant diplomové práce: Mgr. Martin Novák Název diplomové práce: Vývoj LC-MS metody pro stanovení vybraných endokrinních disruptorů Diplomová práce je zaměřena na vývoj a optimalizaci LC−MS metody pro stanovení dvanácti endokrinních disruptorů v plodové vodě u těhotných žen ve třetím trimetru těhotenství. U těchto žen existuje podezření výskytu předčasných porodů v souvislosti se zvýšeným výskytem endokrinních disruptorů v plodové vodě. Jako extrakční metoda pro izolaci analytů z plodové vody byla vybrána extrakce z kapaliny do kapaliny pomocí 4-methylpentan-2-onu. Pro separaci byla použita vysokoúčinná kapalinová chromatografie v systému reverzních fází s kolonou Hypersil C4 GOLD (2,1 × 100 mm, částice 1,9 µm). Pro analýzu byla využita gradientová eluce s mobilní fází A (0,5% (v/v) vodný roztok kyseliny mravenčí) a B (0,5% (v/v) roztok kyseliny mravenčí v acetonitrilu) při průtoku 0,5 ml/min, nástřiku 5 µl a 35 řC v kolonovém termostatu. K identifikaci stanovení odezvy jednotlivých analytů byl využit vysokorozlišovací hmotnostní spektrometr Orbitrap Q Exactive Plus s chemickou ionizací za...