Vliv derivátů pyrazinu na obsah sekundárních metabolitů v in vitro kulturách rostlin - III.

Abstract

Jednou z možností, jak zvýšit produkci sekundárních metabolitů v rostlinných kulturách pěstovaných in vitro, je metoda elicitace. V této diplomové práci byl testován vliv abiotického elicitoru z třídy derivátů pyrazinu 1-benzyl-3-(pyrazin-2-yl)urey na produkci flavonolignanů silymarinového komplexu a flavonoidu taxifolinu u in vitro rostlinné kultury Silybum marianum (L.) Gaertn. Deriváty pyrazinu jsou zkoumané pro své herbicidní vlastnosti, elicitace tedy probíhá v důsledku vyvolání stresu. Tkáňové kultury byly pěstované na živném médiu dle Murashigeho a Skooga s přídavkem růstového regulátoru kyseliny α-naftyloctové. Elicitace probíhala jak na kalusových, tak na suspenzních kulturách. Elicitor byl použit ve třech různých koncentracích: c1= 100,0 mg/100 ml; c2= 10,0 mg/100 ml; c3= 1,00 mg/100 ml. Jednotlivé vzorky se odebíraly vždy po 6, 24, 48, 72 a 168 hodinách působení elicitoru. Kontrolní vzorky jen po 6, 48 a 168 hodinách. Kalusové a suspenzní tkáně se usušily a následně pomocí methanolu extrahovaly. Stejným způsobem se odebíraly i vzorky živných médií. Pro stanovení obsahu sekundárních metabolitů byla využita metoda HPLC se spektrofotometrickým detektorem. Flavonolignany silybin A ani silybin B nebyly detekovány v žádném z analyzovaných vzorků. Nejvyšších hodnot obsahu sekundárních...

One of the possibilities how to increase the production of secondary metabolites (SM) in plant in vitro cultures is the method of elicitation. The aim of this work was to determine the effect of an abiotic elicitor from the class of pyrazine derivatives 1-benzyl-3-(pyrazin-2-yl)urea on the production of flavonolignans of silymarin complex and flavonoid taxifolin in the plant culture Silybum marianum (L.) Gaertn. Pyrazine derivatives are investigated for their herbicidal properties, so elicitation proceeds by the mechanism of stress inducing effect. Tissue cultures were grown on Murashige and Skoog growth medium with the addition of the growth regulator α-naphthylacetic acid. Elicitation was performed on both callus and suspension cultures. The elicitor was used in three different concentrations: c1 = 100.0 mg/100 ml; c2 = 10.0 mg/100 ml; c3 = 1.00 mg/100 ml. Particular samples were taken after 6, 24, 48, 72 and 168 hours of elicitor effect, control samples after 6, 48 and 168 hours. After drying, the callus and suspension tissues were extracted with methanol and the content of the monitored secondary metabolites was determined by HPLC. It was also tested if SM are released into the growth medium. Flavonolignans silybinin A and silybinin B were not detected in any of the analyzed samples. The...