Ovariální karcinomy - vliv rodiny Rho kináz na migraci buněk

Abstract

Author: Veronika Barešová Title: Ovarian carcinomas - the influence of Rho family kinases on cell migration Diploma thesis Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Ovarian carcinomas are the deadliest group of gynecological malignancies. This is due to a high rate of metastasis and acquired drug resistance. Metastasis is characterized by a phenotypic change of cells from epithelial to mesenchymal, resulting in the loss of cell-cell and cell-extracellular matrix contacts and subsequent cell movement. This process is called epithelial-mesenchymal transition and has been shown to also play a role in cell resistance to cisplatin. The movement of individual cells is mediated by the Rho GTPase family and can be divided into mesenchymal and amoeboid types. The amoeboid type is characterized by the Rho/ROCK signaling pathway, while mesenchymal movement is mediated by the Rac/Cdc42 pathways. In my thesis, we investigated the differences in expression of selected proteins in both signaling pathways in ovarian carcinoma cells. Initially, we focused on comparing the A2780 and A2780cis cell lines, which are resistant to cisplatin. We monitored markers of amoeboid movement, RhoA and phosphorylated myosin, and markers of mesenchymal movement, Wave-2,...

Autor: Veronika Barešová Název: Ovariální karcinomy - vliv rodiny Rho kináz na migraci buněk Diplomová práce Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Ovariální karcinomy jsou nejsmrtelnější skupinou gynekologických malignit. Je to dáno vysokou mírou metastázování a získané lékové rezistence. Metastázování je charakteristické změnou fenotypu buněk z epiteliálního na mezenchymální, čímž dochází ke ztrátě kontaktů buňka-buňka a buňka-extracelulární matrix a následnému pohybu buněk. Tento proces se nazývá epitelo-mezenchymální tranzice a bylo prokázáno, že také hraje roli v rezistenci buněk na cisplatinu. Pohyb jednotlivých buněk je zprostředkován rodinou Rho GTPáz a můžeme ho rozdělit na mezenchymální a améboidní typ. Pro améboidní je typická signální dráha Rho/ROCK, kdežto mezenchymální pohyb je zprostředkován drahami Rac/Cdc42. V mé diplomové práci jsme sledovali rozdíly v expresi vybraných proteinů obou signálních drah v buňkách ovariálních karcinomů. V první fázi jsme se zaměřili na porovnání buněčných linií A2780 a A2780cis, která je rezistentní na cisplatinu. Sledovali jsme markery améboidního pohybu RhoA a fosforylovaný myozin a markery pohybu mezenchymálního Wave-2, PAK a fosforylovaný PAK. Ve druhé fázi jsme sledovali vliv EGF a...