Sledovanie antioxidačnej aktivity novo syntetizovanych potenciálnych modulátorov acetylcholinesterasy

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Žaneta Keratová Supervisor: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Consultant: RNDr. Ľubica Múčková, Ph.D. Title of diploma thesis: Monitoring the antioxidant activity of newly synthesized potential acetylcholinesterase modulators. The theoretical part of the diploma thesis focuses on the characteristics of oxidative stress (OS) and antioxidant protection of the organism. In the next part, neurodegenerative diseases and the importance of OS in their development are discussed in detail. In the experimental part, the cytotoxicity of new potential acetylcholinesterase modulators was evaluated using the neuroblastoma cell line SH-SY5Y. The cytotoxicity of the compounds, expressed as IC50, was measured by a colorimetric method using the tetrazolium salt (MTT). This method was also used to determine the maximum tolerated concentration (MTC). These values were subsequently validated by measuring the apoptotic profile of cells in a physiological environment (without OS) and hydrogen peroxide (H2O2)-induced OS using microcapillary flow cytometry. The results showed that the compounds did not induce any statistically significant change in the distribution of cells in each population. Subsequently, the antioxidant...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Žaneta Keratová Vedoucí diplomové práce: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Konzultant: RNDr. Ľubica Múčková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Sledovanie antioxidačnej aktivity novo syntetizovaných potenciálnych modulátorov acetylcholinesterasy Teoretická časť diplomovej práce je zameraná na charakteristiku oxidačného stresu (OS) a antioxidačnej ochrany organizmu. V ďalšej časti sú podrobne spracované jednotlivé neurodegeneratívne ochorenia a význam OS pri ich rozvoji. V experimentálnej časti predkladanej práce bola hodnotená cytotoxicita 16 nových potenciálnych modulátorov acetylcholinesterasy pomocou neuroblastómovej bunkovej línie SH-SY5Y. Cytotoxicita látok, vyjadrená ako IC50, bola meraná pomocou kolorimetrickej metódy, ktorá využíva tetrazóliovú soľ (MTT). Táto metóda bola využitá aj k stanoveniu maximálnej tolerovateľnej koncentrácie (MTC). Hodnoty MTC boli následne overené pomocou sledovania apoptoticko-nekrotického profilu buniek vo fyziologickom prostredí (bez OS) a v prostredí OS, ktoré bolo indukované peroxidom vodíka (H2O2) pomocou mikrokapilárnej prietokovej cytometrie. Z výsledkov bolo patrné, že látky nevyvolali žiadnu štatisticky významnú zmenu distribúcie buniek v jednotlivých populáciách....