Fotochemická internalizace saporinu ftalocyaninovými fotosensitizéry

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Student: Bc. Kateřina Vlková Supervisor: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Consultant: Mgr. Monika Rohlíčková Title of the diploma thesis: Photochemical internalization of saporine by phthalocyanine photosensitisers The application of therapeutic macromolecules is often affected by limited cellular uptake and lysosomal degradation, thus failing to reach their intracellular targets. Their cellular uptake can be increased through photochemical internalization. Photochemical internalization uses photosensitive agents that localize in the membranes of endosomes and induce drug release upon exposure to light. This diploma thesis is focused on the evaluation of the effect of saporin in the combination with non-symmetrical photosensitizers on HeLa cell line using photochemical internalization. Effect of various concentrations of these compounds on the viability of tumour cells was evaluated. Two approaches to deliver the energy from light were compared as well: before and after the administration of saporin (i.e., "light-before" and "light-after" approach). From obtained data, it is evident that saporin (administered alone) does not significantly reduce the viability of HeLa cells, even though it was applied in a...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Student: Bc. Kateřina Vlková Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Konzultant: Mgr. Monika Rohlíčková Název diplomové práce: Fotochemická internalizace saporinu ftalocyaninovými fotosensitizéry Aplikace terapeutických makromolekul je často ovlivněna omezeným vstupem těchto látek do buněk a jejich následnou lyzosomální degradací, čímž nedosáhnou svých intracelulárních cílů. Jejich buněčný příjem lze zvýšit prostřednictvím fotochemické internalizace. Fotochemická internalizace využívá fotosenzitivní látky, které se lokalizují v membránách endosomů a vyvolají uvolnění účinných látek po expozici světlu. Diplomová práce, metodou fotochemické internalizace, zkoumá vliv cíleného toxinu saporinu a vybraných nesymetrických fotosensitizérů na buněčné linii HeLa. Hodnotí účinek různých koncentrací těchto látek na životaschopnost nádorových buněk. Dále se zabývá porovnáváním dvou přístupů dodání světelné energie, a to před a po podání saporinu - tzv. "light-before" a "light-after" přístup. Z našich dat je patrné, že samostatně podaný saporin příliš nesnižuje životaschopnost testované linie, přestože byl aplikován v poměrně vysoké koncentraci. Snahou bylo vytvořit účinnou kombinaci koncentrací PS a saporinu. Nicméně z...