Signalizace protein kinázy B a exprese cyklooxygenáz v časných fázích diabetické nefropatie

Abstract

Akt kináza (Akt) je součástí kaskád převádějících signály vasoaktivních a růstových faktorů. Akt- dependentní procesy se podílejí na regulaci mechanismů relevantních pro renální patofyziologii jako jsou syntéza proteinů, viabilita, produkce NO, reabsorbce sodíku atd. Poruchy regulace renálních isoforem cyklooxygenáz produkujících biologicky významné prostanoidy mohou rovněž přispět k známým patofyziologickým mechanismům v rozvoji nefropatie a hypertenze jako důsledek molekulárních abnormalit při diabetu. Cíl: Práce je zaměřena na studium aktivity Akt a jejích efektorů, proteinů "mammalian target of rapamycin"(mTOR) a endoteliální NO syntázy (eNOS), spolu s expresí a aktivitou cyklooxygenázy 2 (COX2) v časných fázích diabetu a jejich úlohu v patofyziologii renálních moďologických a hemodynamických změn při diabetu. Materiál a metody: Aktivita Akt v renálním kortexu byla měřena pomocí kinázové assay. Exprese proteinů byla kvantifikována immunoblottingem. Studie byly prováděny na modelu DMI, tj. na potkanech u nichž byl diabetes navozen podáním streptozotocinu. Pokusná zviřata byla rozdělena do 3 skupin. První skupina diabetických zvířat byla ponechána bez léčby (STZO), druhá skupina (STZ4) byla léčena 4 jednotkanň insulinu denně a třetí skupina (STZ 12) byla léčena 12 jednotkanů insulinu denně. Cílem...

Introduction: Renal hypertrophy, extracellular matrix accumulation, aItered apoptosis as well as changes in regional hemodynamics have been implicated in the pathophysiology of nephropathy in diabetes mellitus (DM). On the molecular level the detailed mechanisms for development of diabetic nephropathy (DN) have becn intensively studied. Insulin induces a variety of biologicaI effects in a number of cell types via phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K)/Akt kinase signaling pathway. Considering multiple function of Akt that incIude potentiaIly hannful pro-growth effects mediated by mTOR and cyclooxygenas-2 (COX-2), as well as protective effects mediated by endotheliaI nitric oxide synthase (eNOS), it is possible that aIterations in activities of Akt may play role in the pathophysiology ofDN. Renal corticaI activity and expression of Akt, its down-strearn effectors mTOR, eNOS, and "C<JIX-:Z. as well as PTEN, an endogenous Akt inhibitor, were investigated in streptozotocin (STZ): diabetic rats as a model of Type 1 DM with different levels of glycenůc control, and in Zucker ~d.iabetic fatty rats, a model ofDM2, and in nondiabetic rats as controls. Methods: Akt activity was measured by kinase assay. Protein expressions were measured by .immunoblotting and immunohistochemistry in renal cortex of 4- and 12- week old...