Kolorimetrická analýza vybraných biochemických markerů pomocí fotografické techniky

Abstract

University of Pardubice Faculty of Chemical Technology in Pardubice Performed at: University of defence in Brno, Fakulty of Military Health Sciences in Hradec Králové, Department of Molecular Pathology and Biology Student: Kateřina Mackurová Leader of diploma thesis: pplk. prof. RNDr. Miroslav Pohanka, Ph.D., DSc. Consultant: Mgr. Šárka Štěpánková, Ph.D. Title of diploma thesis: Colorimetric Analysis Of Biochemical Markers Using Photography Keywords: colorimetry, acetylcholinesterase, tacrine, photometric method Acetylcholine, which is responsible for synaptic transmission, is nowadays considered to be the main neurotransmitter in the brain. It is degraded into choline and acetate by two enzymes - acetylcholinesterase (AChE) (EC 3.1.1.7) and butyrylcholinesterase (BChE) (EC 3.1.1.8) AChE inhibitors represent an interesting subject of current scientific research since they belong to the main treatments for Alzheimer's disease or myasthenia gravis. The aim of the thesis was to verify the photometric equipment while determining the reaction of AChE with the substrate on pH papers, to determine the kinetic parameters AChE, and to optimize the method for the determination of the takrin inhibitor. Furthermore, the goal was to determine the influence of selected matrices on AChE using the photometric...

Univerzita Pardubice Fakulta chemicko-technologická v Pardubicích Vypracováno na: Univerzita obrany v Brně, Fakulta vojenského zdravotnictví v Hradci Králové, Katedra molekulární patologie a biologie Studentka: Kateřina Mackurová Vedoucí práce: pplk. prof. RNDr. Miroslav Pohanka, Ph.D., DSc. Konzultant: Mgr. Šárka Štěpánková, Ph.D. Název diplomové práce: Kolorimetrická analýza vybraných biochemických markerů pomocí fotografické techniky Klíčová slova: kolorimetrie, acetylcholinesteráza, takrin, fotometrická metoda Za hlavní neurotransmiter v mozkových neuronech je považován acetylcholin (ACh), který je zodpovědný za přenos vzruchu. Je degradován dvěma enzymy, a to acetylcholinesterázou (AChE) (EC 3.1.1.7) a butyrylcholinesterázou (BChE) (EC 3.1.1.8) na cholin a acetát. Na inhibitory AChE je kladen velký důraz ve vědecké sféře, jelikož stále patří mezi hlavní léčiva při léčbě Alzheimerovy choroby či nemoci myastenia gravis. Cílem této práce bylo ověřit fotometrickou techniku při stanovení reakce AChE se substrátem na pH papírcích, stanovit kinetické parametry AChE a optimalizovat metodu pro stanovení inhibitoru - takrinu. Dále pak bylo cílem zjistit vliv vybraných matric na AChE pomocí fotometrické techniky. Pokus probíhal na pH papírcích MACHEREY-NAGEL a také na spektrofotometru metodou dle...