Studium regulace genové exprese v ledvinách.

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Student: Aneta Trávníčková Supervisor: PharmDr. Lucie Smutná, PhD. Title of diploma thesis: Study of gene expression regulation in kidneys During evolution, each organism was forced to create its complex defense system to prevent the accumulation of endogenous and foreign substances, including drugs, in the body. These defense systems are composed of Phase I and Phase II enzymes and transport proteins. One of the main roles in the metabolism of endogenous and biotransformation of exogenous substances is ensured by the constitutive androstane receptor (CAR). This work aimed to determine the effect of activation of the human constitutive androstane receptor (hCAR) on the gene expression of drug transporters and biotransformation enzymes in the kidneys of humanized mice. Additionally, to examine the effect of CAR on the expression of selected genes in the HK2 cell line. In both cases, the isolation of mRNA was performed using the classic phenol-chloroform extraction followed by reverse transcription and the qRT-PCR reactions. Firstly, we studied the influence of CITCO, an agonist of hCAR, on the expression of biotransformation and transport protein genes in the kidneys of humanized mice. The expression...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Aneta Trávníčková Školitel: PharmDr. Lucie Smutná, PhD. Název diplomové práce: Studium regulace genové exprese v ledvinách Během vývoje byl každý organismus nucen vytvořit si svůj vlastní komplexní obranný systém zabraňující hromadění endogenních a cizorodých látek, včetně léčiv, v těle. Tyto obranné systémy zahrnují biotransformační enzymy I. a II. fáze metabolismu a transportní proteiny. Jednu z hlavních rolí v regulaci metabolismu endogenních a biotransformaci exogenních látek má konstitutivní androstanový receptor (CAR). Cílem této práce bylo stanovení vlivu aktivace lidského konstitutivního androstanového receptoru (hCAR) u humanizovaných myší na genovou expresi lékových transportérů a biotransformačních enzymů v ledvinách. A následně posoudit vliv aktivace CAR na expresi vybraných genů v HK2 buněčné linii. V obou případech byla základním principem izolace mRNA pomocí standardní fenol-chloroformové extrakce následované reverzní transkripcí a qRT-PCR reakcemi. V první části byl zkoumán vliv CITCO, agonisty hCAR, na expresi genů biotransformačních a transportních proteinů v ledvinách humanizovaných myší. Ke statisticky významnému zvýšení exprese došlo u genů Ugt1a1 a Slc22a1. V druhé části...