Vliv atorvastatinu na expresi a funkci endoglinu u endotelové dysfunkce indukované hyperlipidémií

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Title of Diploma Thesis: Effect of atorvastatin on endoglin expression and function in hyperlipidemia-induced endothelial dysfunction Author: Adéla Holadová Supervisor of Diploma Thesis: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Aim: The aim of this thesis was to determine how atorvastatin affects the expression and function of endoglin and related biomarkers of inflammation/endothelial dysfunction at different concentrations and times in human endothelial cells from the aorta, in which hyperlipidemia was induced by using palmitic acid. Methods: In the diploma thesis, we worked with human aortic endothelial cells. We premedicated them with atorvastatin/palmitic acid at different times and concentrations. Using flow cytometry, we measured the protein expression of endoglin. Furthermore, we used the qRT-PCR method to determine the level of mRNA expression of endoglin, its transcription factors and biomarkers of inflammation. Using the ELISA method, we detected the levels of soluble endoglin. Results: We demonstrated that atorvastatin at a concentration of 5μM after 16 hours of premedication significantly increased the mRNA expression of endothelial nitric oxide synthase, and conversely decreased the...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv atorvastatinu na expresi a funkci endoglinu u endotelové dysfunkce indukované hyperlipidémií Autor: Adéla Holadová Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jakým způsobem atorvastatin ovlivňuje expresi a funkci endoglinu a s ním souvisejících biomarkerů zánětu/endotelové dysfunkce v různých koncentracích a časech u lidských endotelových buněk z aorty, u kterých byla indukovaná hyperlipidémie pomocí kyseliny palmitové. Metody: V diplomové práci jsme pracovaly s lidskými aortálními endotelovými buňkami. Ty jsme premedikovaly atorvastatinem/kyselinou palmitovou v různých časech a koncentracích. Za využití průtokové cytometrie jsme měřily proteinovou expresi endoglinu. Dále jsme využívaly metodu qRT-PCR ke zjištění míry mRNA exprese endoglinu, jeho transkripčních faktorů a biomarkerů zánětu. Pomocí metody ELISA, jsme detekovaly hladiny solubilního endoglinu. Výsledky: Prokázaly jsme, že atorvastatin o koncentraci 5μM po 16h premedikaci signifikantně zvýšil mRNA expresi endoteliální syntázy oxidu dusnatého, a naopak snížil expresi CCL2 (C-C motif chemokine ligand 2). Dále jsme zjistily, že 25μM koncentrace...