Izolace bakteriálního flagelinu jako imunogenu pro přípravu protilátek pro pacienty s cystickou fibrosou

Abstract

Cystická fibroza (CF) je autosomálně recesivní onemocnění, postihující hlavně plíce, ale také i další orgány včetně jater, slinivky břišní a reprodukčních orgánů. V postižených orgánech dochází k nahromadění hustého lepkavého hlenu zvaného těž mukus. CF je způsobena mutacemi v CFTR genu, který se nanchází na dlouhém raménku 7. chromozomy. Tyto mutace vedou pak k mutacím v kódovaném CFTR proteinu. Mutace CFTR proteinů způsobují poruchy transportu chloridových iontů. Jedním z nejčastějších projevů CF jsou časté plicní infekce vyvolané bakteriemi, které se velmi dobře množí v plicním mukusu. Jednou z takových bakterií je Burkholderia cepacia (BC). BC je aerobní, gramnegativní, podmíněně patogenní mikroorganismus, který představuje nebezbečí pro lidi se sníženou imunitou. BC a některé další mikroorganismy se nazývají "bakteriemi nemocnice", což je problém pro pacienty s CF, kteří jsou často hospitalizováni. BC nejčastěji obsahují jeden polární bičík, který slouží k pohybu a adherenci k povrchu buněk hostitele. Bičík, který je především složen z proteinu flagelinu, představuje jeden z hlavních virulentních faktorů bakterie BC. Táto práce je zaměřena na hledání optimálního způsobu izolace bakteriálního flagelinu z bakterie Burkholderia cepacia. Flagelin pak může sloužit jako imunogenem pro přípravu...

Cystic fibrosis (CF) is an autosomal recessive disease affecting mainly the lungs, but also other organs including the liver, pancreas and reproductive organs. In the affected organs, there is a build-up of thick sputum called mucus. CF is caused by mutations in the CFTR gene, which is located on the long arm of the 7. chromosome. These mutations then lead to mutations in the encoded CFTR protein. Mutations in the CFTR protein cause defects in chloride ion transport. One of the most common symptoms of CF is frequent lung infections caused by bacteria that multiply rapidly in the lung mucus. One of those bacteria is Burkholderia cepacia (BC). BC is an aerobic, gram-negative, conditionally pathogenic microorganism that poses a danger to immunocompromised people. BC and some other microorganisms have been called "hospital- acquired bacteria", It is a problem for CF patients who are often hospitalized. BC most often contain a single polar flagellum that serves to move and adhere to the surface of host cells. The flagellum, which is primarily composed of the flagellin protein, represents one of the main virulence factors of BC. The purpose of this research is to find an optimal method for isolating bacterial flagellin from Burkholderia cepacia. Flagellin can then serve as an immunogen for the...