Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Student: Nikola Martínková Supervisor: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Consultant: Mgr. Petr Jošt, Ph.D. Title of diploma thesis: Induction of oxidative stress in skin keratinocyte cells Keratinocytes are part of the epidermis and represent the majority of cells in the upper layer of human skin. When these cells are damaged by mutagenic substances, changes in the composition of the genetic material may occur, and even cell death may occur. Such substances that induce changes in DNA and have mutagenic potential include the chemical warfare agent sulfur mustard. The purpose of this study was to compare the HaCaT keratinocyte cell line with the experimentally derived 3HSM4 cell line in response to hydrogen peroxide-induced oxidative stress. The 3HSM4 cells were prepared by selecting resistant clones of HaCaT cells that were repeatedly exposed to the cytotoxic effects of sulfur mustard. The results of the comparison show that 3HSM4 cells proved to be more resistant to hydrogen peroxide. When glutathione (GSH) synthesis was blocked in both cell types, the cytotoxic effect of hydrogen peroxide was the same. Although 3HSM4 cells were shown to be more resistant in terms of cytotoxicity, they were found to have much...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Studentka: Nikola Martínková Vedoucí práce: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Konzultant: Mgr. Petr Jošt, Ph.D. Název diplomové práce: Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů Keratinocyty jsou součástí epidermis a představují majoritní část buněk svrchní vrstvy lidské kůže. Při poškození těchto buněk mutagenními látkami mohou nastat změny ve složení genetického materiálu, popřípadě může dojít i k zániku buňky. Mezi látky, které navozují změny v DNA a mají mutagenní potenciál lze zařadit i zpuchýřující bojovou chemickou látku sirný yperit. Cílem této práce bylo porovnat buněčnou linii keratinocytů HaCaT s experimentálně odvozenou buněčnou linií 3HSM4 v odpovědi na oxidační stres indukovaný peroxidem vodíku. Buňky 3HSM4 byly připraveny selekcí rezistentních klonů buněk HaCaT, které byly opakovaně vystaveny cytotoxickým účinkům sirného yperitu. Výsledky porovnání ukazují, že buňky 3HSM4 jsou rezistentnější vůči peroxidu vodíku. Pokud byla u obou typů buněk blokována syntéza glutathionu (GSH), byl cytotoxický účinek peroxidu vodíku stejný. Přesto, že se buňky 3HSM4 ukázaly jako odolnější z pohledu cytotoxicity, byla u nich zjištěna mnohem vyšší hladina volných radikálů než u buněk HaCaT. Při analýze...