Změny v epigenetické regulaci v in vivo modelu NAFLD

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Klára Osobová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Gabriela Svobodová Název diplomové práce: Změny v epigenetické regulaci v in vivo modelu NAFLD Tato diplomová práce se zabývá nealkoholovou tukovou chorobou jater (NAFLD), jedná se o skupinu jaterních onemocnění s různou mírou poškození jaterní tkáně, od prosté steatózy (NAFL) přes steatohepatitidu (NASH) po jaterní fibrózu až cirhózu. Diplomová práce se zaměřuje na popis patogeneze NAFLD a epigenetické změny s ní spojené. Cílem předkládané diplomové práce bylo zmapovat změny v epigenetické regulaci v in vivo myších modelech NAFLD, která byla navozena dietou s vysokým obsahem tuků, fruktózy a cholesterolu (FFC), aplikací glutamátu monosodného (MSG) nebo kombinací těchto faktorů. Na myších modelech byl také zkoumán vliv léčby pomocí liraglutidu a peptidu LipR31. Pomocí kvantitativní PCR (polymerázová řetězcová reakce) byly stanoveny změny v jaterní expresi mRNA pro enzymy regulující epigenetické modifikace (histondeacetylázy, DNA-metyltransferázy, histonacetyltransferázy) a v expresi mikroRNA (miR). Pro stanovení exprese proteinů HDAC8 (histondeacetyláza 8) a HDAC3 (histondeacetyláza 3) byla použita metoda imunoblot. Statisticky...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Klára Osobová Supervisor: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Consultant: Mgr. Gabriela Svobodová Title of diploma thesis: Changes in epigenetic regulation in the in vivo model of NAFLD This diploma thesis deals with non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), a group of liver diseases with varying degrees of damage to liver tissue, from simple steatosis (NAFL) to steatohepatitis (NASH), liver fibrosis and cirrhosis. The diploma thesis focuses on the description of the pathogenesis of NAFLD and the epigenetic changes associated with it. The aim of this thesis was to map the changes in epigenetic regulation in in vivo mouse models of NAFLD, which was induced by a high fat, fructose, and cholesterol (FFC) diet, the application of monosodium glutamate (MSG) or a combination of these factors. The effect of treatment with liraglutide and the peptide LipR31 was also investigated in mouse models. Changes in hepatic mRNA expression for enzymes regulating epigenetic modifications (histone deacetylase, DNA-methyltransferase, histone acetyltransferase) and microRNA expression (miR) were determined using quantitative PCR (polymerase chain reaction). The immunoblot method was used to determinate the protein...