Využití metody HILIC pro hodnocení stability kyseliny askorbové

Abstract

Autor: Soňa Pavlovičová Název: Využití metody HILIC pro hodnocení stability kyseliny askorbové Jazyk: český Klíčová slova: kyselina askorbová, stabilita, HILIC, stabilizační činidlo Kyselina askorbová, vitamin C, je látka velmi polární, a je proto velmi obtížně analyzovatelná pomocí kapalinové chromatografie na reverzních fázích. Z tohoto důvodu byla vyvinuta metoda HILIC (Hydrophilic interaction liquid chromatography) a optimalizovány podmínky pro analýzu. Analýza probíhala na koloně ZIC-HILIC (150 x 2,1 mm, 3,5 μm), mobilní fáze se skládala z acetonitrilu a 50 mM pufru octanu amonného o pH 6,8. Za daných podmínek trvala analýza asi 4 minuty. Ke kvantifikaci byla použita kyselina chlorogenová. Metoda využívá UV detekci při 268 nm. Byl sledován vliv jednotlivých faktorů, jako je teplota, koncentrace, přítomnost kyslíku, pH vodné části roztoku na stabilitu kyseliny askorbové a byl zkoumán vliv stabilizačních činidel různého typu. Optimálních podmínek bylo dosaženo snížením teploty na 4řC a použitím 10 mM kyseliny šťavelové jako stabilizačního činidla. Dobrých výsledků bylo dosaženo i při použití 5 % kyseliny o-fosforečné. Metoda byla validována a vyhovovala požadavkům lékopisu.

Author: Soňa Pavlovičová Title: The application of HILIC method in the stability evaluation of ascorbic acid Language: czech Keywords: ascorbic acid, HILIC, stability, stabilizating agents Ascorbic acid, vitamin C, is a very polar compound, and is therefore difficult to be analysed by RP-HPLC. For these reason HILIC method (Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography) was developed and the optimal conditions for the analysis were determined. The analysis occured on the ZIC-HILIC column (150 x 2.1, 3.5 μm), the mobile phase consisted from acetonitrile and 50 mM ammonium acetate buffer pH 6.8. The method used UV detection at 268 nm. Under these conditions the analysis take approximately 4 minutes. Chlorogenic acid was used for quatification. Various stability factors as temperature, concentration, the presence of oxygen and pH of the solution were studied. This work also solved the troubles with stabilizating agents and their influence on stability of ascorbic acid. Optimal conditions were obtained, when the temperature was decreased to 4řC and 10 mM oxalic acid was used for stabilization. Good results were also obtained with 5 % o-phosphoric acid as stabilizating agent. The method was validated and it met pharmacopea requirements.