Vývoj a validace modelu korneocytální lipidové obálky in vitro I

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmaceutickej technológie Školiteľ: PharmDr. Anna Paraskevopoulou, Ph.D. Autor: Frederika Tkáčová Názov diplomovej práce: Vývoj a validace modelu korneocytální lipidové obálky in vitro I Jednou z mnohých funkcií kože je obranyschopnosť organizmu a ochrana vnútorného prostredia. Túto bariérovú funkciu kože zaisťuje vo veľkej miere epidermis, ktorá sa ďalej člení až do jej najvrchnejšej vrstvy stratum corneum (SC). SC je štruktúra zložená z korneocytov, čo sú ploché bezjaderné keratinocyty, ktoré prešli určitým stupňom diferenciácie. Korneocyty majú na svojom povrchu tesne pod cytoplazmatickou membránou zrohovatený obal nazvaný korneocytálna lipidová obálka (CLE). Táto obálka je monovrstva lipidov kovalentne naviazaná na proteíny na povrchu korneocytov. Predpokladá sa, že CLE hrá dôležitú úlohu buď ako lešenie pre extracelulárne lamely alebo pre súdržnosť koreneocytov. Aby táto funkcia mohla byť lepšie preskúmaná je potrebné vyvinúť rôzne modely CLE. Cieľom tejto práce bolo teda vyvinúť a validovať metódu pre izoláciu CLE a otestovať metódu čistenia CLE pomocou gradientovej centrifugácie. Prvým krokom v tejto ceste izolácie CLE bola izolácia SC z ľudskej kože podľa už skôr publikovanej literatúry a z nej extrahovať voľné lipidy. Z...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Technology Supervisor: PharmDr. Anna Paraskevopoulou, Ph.D. Author: Frederika Tkáčová Title of the thesis: Corneocyte lipid envelope in vitro model development and validation I The skin serves many functions, one of which is to defend the body and protect its internal systems. This defence is primarily carried out by the epidermis, specifically its outermost layer known as the stratum corneum (SC). The SC is composed of specialized cells called corneocytes that have undergone differentiation and developed an envelope directly beneath their cytoplasmatic membrane known as the corneocyte lipid envelope (CLE). This envelope is made up of lipids covalently bound to proteins on the corneocytes' surface and is believed to play a crucial role in supporting extracellular lamellae or promoting corneocyte cohesion. To gain a better understanding of its function, it is necessary to develop various models for studying the CLE. The objective of this study was to establish and validate a method for isolating the CLE and to evaluate the effectiveness of CLE purification using gradient centrifugation. The initial step in the CLE isolation process involved extracting the SC from human skin, following previously published...