Online chemické štěpení proteinů pro rychlou analýzu bioléčiv a identifikaci bakterií

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department od Analytical Chemistry Candidate: Bc. Han Štefanská Supervisor: PharmDr. Juraj Lenčo, Ph.D. Title of diploma thesis: Online chemical cleavage of proteins for rapid analysis of biopharmaceuticals and identification of bacteria In 2023, Dr. Lenčo and his team published a fast and easy method of liquid chromatography coupled with mass spectrometry for protein analysis. The method consisted of the cleavage of proteins in a subcritical acidified mobile phase. This method demonstrated success in the rapid detection of ricin. Other potential applications of the method may include the rapid characterization of protein biopharmaceuticals and the rapid identification of bacteria. Protein biotherapeutics based on monoclonal antibodies are highly effective and safe. These drugs are particularly used to treat serious diseases such as oncological and autoimmune disorders. The increased number of approved antibody-based drugs compared to conventional chemical therapies in recent years demonstrates their significant therapeutic potential. A certain disadvantage is their complex structure and the related need for thorough analysis and quality monitoring, where rapid online sample preparation could bring certain advantages. Currently, the main...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Hana Štefanská Školitel: PharmDr. Juraj Lenčo, Ph.D Název diplomové práce: Online chemické štěpení proteinů pro rychlou analýzu bioléčiv a identifikaci bakterií V roce 2023 Dr. Lenčo se svým týmem publikoval rychlou a nenáročnou metodu kapalinové chromatografie spojené s hmotnostní spektrometrií pro analýzu proteinů. Metoda spočívala ve štěpení proteinů v subkritické okyselené mobilní fázi. Tato metoda byla úspěšně použita pro rychlou detekci ricinu. Další potenciální využití této metody zahrnuje rychlou charakterizaci proteinových bioléčiv a rychlou identifikaci bakterií. Proteinová bioléčiva, která vycházejí z monoklonálních protilátek, jsou vysoce účinná a bezpečná. Tato léčiva se využívají zejména při léčbě závažných onemocnění, jako jsou onkologická onemocnění a autoimunitní poruchy. Zvýšený počet schválených protilátkových léčiv v nedávných letech dokládá jejích významný terapeutický potenciál. Jistou nevýhodou je jejich komplexní struktura a s tím související potřeba důkladné analýzy a monitorování kvality, kde by rychlá online příprava vzorků mohla přinést určité výhody. V současnosti se v klinické diagnostice bakterií uplatňuje především hmotnostní spektrometrie MALDI-TOF, která dokáže změřit...