Analýza protilátek proti HLA antigenům metodou luminex u pacientů před a po transplantaci ledviny

Abstract

This work focuses on mastering the technique of examining anti-HLA antibodies using the multiplex Luminex method. The aim was to become proficient in working with analytical software capable of evaluating the specificity and levels of individual anti-HLA antibodies in patients' sera before and after kidney transplantation. Additionally, cut-off values for screening for anti-HLA antibodies in the assessed patient cohort were determined. Furthermore, an analysis of sensitization to individual HLA antigens was performed in a group of patients with low antibody levels. In the theoretical part of this work, I addressed the major histocompatibility system (HLA system) and its significance in transplantology. I also focused on the issues of transplant immunity and the principles of alloreactivity and rejection. I discussed the origin and significance of HLA antibodies and examined various methods for analyzing anti-HLA antibodies, particularly the multiplex Luminex method. In the experimental part, conducted at the Department of Clinical Immunology and Allergology in Hradec Kralove, I analyzed antibodies targeting HLA class I and II antigens using the multiplex Luminex method. Screening index values were monitored for both HLA classes. In subsequent typing examinations, MFI values were observed for...

Tato práce se zaměřuje na zvládnutí techniky vyšetření anti-HLA protilátek pomocí multiplexové metody Luminex. Cílem bylo osvojit si práci s analyzačním softwarem, který umožňuje vyhodnocování specifit a hladin jednotlivých anti-HLA protilátek v sérech pacientů před a po transplantaci ledviny. Zároveň byly posouzeny cut-off hodnoty pro screeningové vyšetření anti-HLA protilátek u souboru hodnocených pacientů. Dále byla provedena analýza senzibilizace vůči jednotlivým HLA antigenům u skupiny pacientů, kteří měli nízkou hladinou protilátek. V teoretické části této práce jsem se zabývala hlavním histokompatibilitním systémem (HLA systém) a jeho významem v transplantologii. Dále jsem se zaměřila na problematiku transplantační imunity a na principy aloreaktivity a rejekcí. V textu jsem rozebrala vznik a význam HLA protilátek a dále jsem se zabývala různými metodikami analýzy anti-HLA protilátek, zvláště multiplexovou metodou Luminex. V experimentální části, kterou jsem vykonala na oddělení Klinické imunologie a alergologie v Hradci Králové, jsem prováděla analýzu protilátek namířených proti HLA antigenům I. a II. třídy pomocí multiplexové metody Luminex. U obou HLA tříd byly sledovány hodnoty indexů screeningových vyšetření. U pozitivních hodnot indexů byly v následném typizačním vyšetření sledovány...