Porovnání in vitro metod pro studium cytotoxicity

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Pavla Eliášová Školitel: RNDr. Jana Maixnerová, Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání in vitro metod pro studium cytotoxicity Lidé jsou vystaveni stále většímu počtu toxických látek z životního prostředí. Chemikálie narušující endokrinní systém (EDC) jsou širokou třídou molekul, u kterých se předpokládá, že způsobují nepříznivé účinky na endokrinní systém tím, že interferují se syntézou, transportem, degradací nebo působením endogenních ligandů. Jedním z cílů této práce bylo stanovení in vitro toxicity 17 vybraných endokrinních disruptorů na buněčné linii lidského hepatocelulárního karcinomu HepG2. Viabilita buněk byla stanovena pomocí kolorimetrické metody CellTiter96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, jejíž principem je redukce MTS na barevný produkt formazan pomocí mitochondrií v životaschopných buňkách. Cytotoxický potenciál látek byl vyjádřen pomocí toxikologického paramatru IC50, který byl měřen ve třech časových intervalech (6, 12 a 24 hodin). U 14 látek: Atrazin, DHEP, Bisphenol A, Carbofuran, 3-hydroxycarbofuran, Cypermethrin, DDE, DES, MEHP, PCB 118, PCB 153, PFOA, PFOS, Propiconazol bylo stanoveno IC50 > 100 µM (resp. > 250 µM), což znamená, že tyto látky jsou netoxické...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Student: Pavla Eliášová Supervisor: RNDr. Jana Maixnerová, Ph.D. Title of diploma thesis: Comparison of in vitro methods for the study of cytotoxicity People are exposed to a growing number of toxic substances from the environment. Endocrine disrupting chemicals (EDCs) are a broad category of molecules that are thought to cause adverse effects on the endocrine system by interfering with the synthesis, transport, degradation or action of endogenous ligands. One of the aims of this thesis was to determine the in vitro toxicity of 17 selected endocrine disruptors on the human hepatocellular carcinoma HepG2 cell line. Cell viability was determined using the CellTiter96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay colorimetric method, the principle of which is the reduction of MTS to the colored product formazan by mitochondria in viable cells. The cytotoxic potential of the compounds was expressed by using the toxicological parameter IC50, which was measured in three time intervals (6, 12 and 24 hours). For 14 substances: Atrazine, DHEP, Bisphenol A, Carbofuran, 3-hydroxycarbofuran, Cypermethrin, DDE, DES, MEHP, PCB 118, PCB 153, PFOA, PFOS, Propiconazole, IC50 > 100 µM (respectively > 250 µM) was...