Využití kapalinové chromatografie ve farmaceutické analýze VI.

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Barbora Tučková Školitel: PharmDr. Pavla Pilařová, Ph.D. Název diplomové práce: Využití kapalinové chromatografie ve farmaceutické analýze VI. Tato diplomová práce se věnuje optimalizaci podmínek HPLC metody, která se používá ke stanovení léčiva imatinibu ve FN HK. Chromatografická separace imatinibu probíhala na koloně: Gemini NX 5 μm C18, 150 × 4,6 mm. Byl testován vliv teploty na koloně, koncentrace octanového pufru, složení mobilní fáze s různými poměry vodné a organické složky a vliv gradientu průtoku. Jako optimální byly zvoleny tyto podmínky: mobilní fáze 70% methanol-30% 10 mM octan amonný o pH 10, průtok 0,8 ml/min [0-1,5 min.], 1,2 ml/min [1,5-5 min.], 1,2 ml/min [5-13 min.], vlnová délka 260 nm a teplota 40 řC. Zároveň byly optimalizovány podmínky extrakce imatinibu z biologického materiálu. Byla testována deproteinace a liquid-liquid extrakce a změna poměru hexan-ethylacetát. Nejvýhodnější byla zvolena LLE extrakce a poměr hexan-ethylacetát 15:85. V průběhu testování byla metoda rozšířena o další dvě léčiva: dasatinib a nilotinib. Na závěr byla tyto tři léčiva analyzována pomocí HPLC s MS detekcí. U metody byly testovány vybrané validační parametry...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department: Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate: Barbora Tučková Tutor: PharmDr. Pavla Pilařová, Ph.D. Title of Thesis: Use of Liquid Chromatography in Pharmaceutical Analysis VI. This diploma thesis is focused on optimization HPLC method used in University hospital Hradec Králové for determination of imatinib. Separation was performed on column: Gemini NX 5 μm C18, 150 × 4,6 mm. There was tested the influence of temperature on column, concentration of ammonium acetate, composition of the mobile phase with changing levels of organic and aqueous components and influence of flow gradient. The optimal conditions of separation were chosen: mobile phase 70% metanol-30% 10 mM amonium acetate pH 10, the flow rate 0,8 ml/min [0-1,5 min.], 1,2 ml/min [1,5-5 min.], 1,2 ml/min [5-13 min.], the detection in the UV the wavelenght of 260 nm and the temperature on the column 40 řC. At the same time extraction of imatinib from biological sample was optimized. The deproteinization and liquid-liquid extraction and ratio of hexane-ethyl acetate were tested for the analysis of biological material. Liquid-liquid extraction and 15:85 hexane-ethyl acetate were chosen as more efficient. The method was extended to other two...