In vitro reaktivace cholinesteras inhibovaných pesticidy

Abstract

Souhrn In vitro reaktivace cholinesteras inhibovaných pesticidy Organofosforové pesticidy jsou toxické látky komerčně dodávané jako insekticida pro ochranu zemědělských komodit, protiepidemických opatření atd. Použití pesticidů je v České republice regulováno zákonem, a v rámci celé Evropské unie je trendem sledovat a regulovat používání přípravků s obsahem pesticidů. V diplomové práci jsem hodnotila účinnost nově připravených oximových reaktivátorů acetylcholinesterasy (AChE) za použití standardní spektrofotometrické metody a multikanálového spektrofotometru. Po experimentálním testování schopnosti inhibovat AChE jsem vybrala tři pesticidy schopné vazby na AChE bez metabolické aktivace: paraoxon ethyl, paraoxon methyl a DFP. Následně jsem experimentálně sledovala schopnost 78 vybraných oximových reaktivátorů in vitro obnovit aktivitu AChE po předchozí inhibici. Podařilo se dokázat, že DFP inhibovanou AChE lze reaktivovat s vysokou účinností za pomocí monokvartérních reaktivátorů, ale i biskvartérní reaktivátory jsou rovněž účinné. Naproti tomu se paraoxon ethyl a stejně tak i paraoxon methyl ve větší míře daly reaktivovat pouze biskvartérními reaktivátory. Počet oximových skupin se nezdá být důležitým faktorem předurčujícím účinnost těchto reaktivátorů pro paraoxon methyl a ethyl. Závěrem lze říci, že v...

In vitro reactivation of choliesterases after pesticides inhibition Organophosphate pesticides are toxic substances supplied commercially as insecticides in order to protect agricultural commodities, for suppression of epidemic events etc. The use of pesticides in the Czech Republic is strongly regulated by law similarly as in the whole EU. The regulation is aimed at monitoring and regulating the use of products containing toxic pesticides. In this diploma work, I measured the efficacy of previously synthesized oxime reactivators using the standard spectrophotometric method and multi-channel spectrophotometer. After experimental testing, the ability of selected pesticides to inhibit acetylcholinesterase (AChE) was assessed. I choose tree pesticides that are capable of binding to AChE without any metabolic activation. It was paraoxon ethyl, paraoxon methyl, and DFP. Subsequently, I experimentally observed the ability of 78 selected oximes reactivators to restore AChE activity in vitro. I proved that the DFP inhibited AChE can be reactivated with high efficacy using monopyridinium reactivators but bispyridinium reactivators are also suitable. In contrast to DFP, paraoxon ethyl as well as paraoxon methyl inhibited AChE was reactivated with only bispyridinium reactivators. Number of oxime groups isn not...