Stanovení biologicky aktivních látek metodou sekvenční injekční analýzy s chemiluminiscenční detekcí

Abstract

1.1 Souhrn Byla navržena a optimalizována jednoduchá a rychlá metoda pro stanovení norepinefrinu metodou sekvenční injekční analýzy s chemiluminescenční detekcí. Optimalizovanými parametry byly objemy a koncentrace vzorku norepinefrin bitartrátu a reagencií, průtoková rychlost, složení nosného proudu a napětí na fotonásobiči. Optimální objem vzorku byl 80 μl a optimální koncentrace činidel (a aspirované objemy) byly - 25 mM polyfosfát sodný (44 μl), 0,1 M kyselina sírová (24 μl) a 1 mM manganistan draselný (21 μl). Optimální průtoková rychlost (pro průchod detektorem) byla 91 μl/s a napětí na fotonásobiči bylo 450 V. Jako nosný proud byla použita ultračistá voda. Kalibrační křivka byla lineární v rozsahu koncentrací 1 - 40 μmol/l norepinefrin bitartrátu. Parametry kalibrační křivky y = kx + q (kde y je intenzita chemiluminiscence v nA a x je koncentrace norepinefrin bitartrátu v μmol/l) byly vypočítány metodou lineární regrese. Směrnice k byla 33.923 a absolutní člen q byl 34.839. Korelační koeficient byl 0,9997. Relativní směrodatné odchylky byly 2.78 a 1.18 % (n = 10) pro stanovení norepinefrin bitartrátu ve standardních roztocích o koncentracích 4.75 a 18.98 μmol/l. Limit detekce (LOD) byl 0.28 μmol/l a limit kvantifikace (LOQ) byl 3.34 μmol/l. Navrhovaná SIA metoda byla použita pro stanovení obsahu...

1.1 Abstrakt A simple and rapid automated method for the assay of norepinephrine by sequential injection analysis (SIA) with chemiluminescence detection was devised and optimised. The optimised parameters were aspirated volumes of the norepinephrine bitartrate sample and reagents, flow rate, composition of the carrier stream and the photomultiplier voltage. Optimum sample volume was 80 μl and the optimum reagent concentrations (and aspirated volumes) were - 25 mM sodium polyphosphate (44 μl), 0,1 M sulphuric acid (24 μl) and 1 mM potassium permanganate (21 μl)., The optimum flow rate (for pushing the luminescent zone to the detector) was 91 μl/s and the photomultiplier voltage was 450 V. The carrier stream was ultrapure water. The calibration curve was rectilinear in the range 1 - 40 µmol/l of norepinephrine bitartrate. The parameters of the calibration curve y = kx + q (where y is the intensity of chemiluminescence in nA and x stands for the concentration of norepinephrine bitartrate in µmol/l) were calculated by the linear regression method. The slope k was 33.923 and the intercept q was 34.839. The correlation coefficient was 0.9997. The relative standard deviations were 2.78 or 1.18 % (n = 10) when determining 4.75 or 18.98 µmol/l norepinephrine bitartrate in pure standard solutions respectively. The...