Abiotická elicitace explantátové kultury Trifolium pratense L.

Abstract

Abiotická elicitace explantátové kultury Trifolium pratense L. Souhrn Cílem této diplomové práce bylo sledovat vliv abiotických elicitorů chloridu rtuťnatého a chloridu kademnatého na produkci flavonoidů, a u elicitoru chloridu rtuťnatého také isoflavonoidů, u explantátové kultury Trifolium pratense L. (varieta DO−8). Kultury byly kultivovány na živném médiu podle Gamborga s přídavkem 2,4−dichlorfenoxyoctové kyseliny (2 mg.l-1 ) a 6−benzylaminopurinu (2 mg.l-1 ) při teplotě 25 řC a světelné periodě 16 hodin světlo/8 hodin tma. Obsah flavonoidů byl stanoven spektrofotometricky dle Českého lékopisu 2005. Obsah isoflavonoidů byl stanoven metodou HPLC. Z výsledků je zřejmé, že u obou použitých abiotických elicitorů má nejvýznamnější pozitivní efekt na produkci flavonoidů explantátovou kulturou Trifolium pratense L. (varieta DO−8) koncentrace elicitoru 10 μmol. Nejvyšší obsah flavonoidů (0,576 %) byl zaznamenán při elicitaci chloridem kademnatým o koncentraci 10 μmol při době působení 48 hodin, kdy došlo ke statisticky významnému zvýšení obsahu flavonoidů o 294 % oproti kontrole. Metodou HPLC byl stanoven obsah isoflavonoidů při elicitaci explantátové kultury Trifolium pratense L. (varieta DO−8) chloridem rtuťnatým. Nejsilnější elicitační účinek měla koncentrace elicitoru 0,1 μmol při době působení 48 hodin....

Abiotic elicitation of explant culture of Trifolium pratense L. Summary The objective of this dissertation was to observe the effect of the abiotic elicitors of mercuric chloride and cadmium chloride on the production of flavonoids, and also of the effect of the mercuric chloride elicitor on the production of isoflavonoids in the Trifolium pratense L. explant culture (variety DO−8). The cultures were cultivated in the Gamborg nutrient media with the addition of 2,4−dichlorphenoxyacetic acid (2 mg.l-1 ) and 6−benzylaminopurine (2 mg.l-1 ), in the temperature of 25 řC and during a 16-hours light/8-hours dark period. The quantity of flavonoids was determined spectrophotometrically according to The Czech Pharmacopoeia 2005. The quantity of isoflavonoids was determined by the HPLC method. We can see from the results of this dissertation that the concentration 10 μmol of both of the used abiotic elicitors had the greatest positive effect on the production of flavonoids. The largest quantity of flavonoids (0,576 %) was detected during the elicitation of cadmium chloride of a 10-μmol concentration and after 48−hour application when the quantity of flavonoids increased by statistically significant 294 % in relation to the control sample. The quantity of isoflavonoids was determined by the HPLC method during the...