Hodnocení antiprotozoální aktivity pomocí Tetrahymena pyriformis

Abstract

Název diplomové práce: Hodnocení antiprotozoální aktivity pomocí Tetrahymena pyriformis Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Jméno diplomanta: Daniela Osecká Jméno školitele: Mgr. Jitka Vytlačilová Protozoální patogeny způsobují asymptomatické i symptomatické infekce. Riziko nákazy hrozí téměř každému člověku, proto je antiprotozoální terapie velmi důležitá. Tetrahymena pyriformis je jednobuněčný organismus, který jsme v rámci testování vystavili působení tří látek, albendazolu, mebendazolu a ornidazolu. Použili jsme dvě metody aplikované na měření životaschopnosti prvoka. Je to základní metoda testování inhibice růstu organismu Protoxkit FTM využívající přeměnu potravinové suspenze v biomasu nálevníka a metoda MTT, která využívá redukci MTT barviva (3-[4,5-dimethyl-thiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromid). Ze spektrofotometricky naměřených dat jsme se sestavili tabulky a grafy závislosti optické hustoty na době kultivace a vypočítali procenta inhibice pro pět sestupných koncentrací testovaných látek. Naším cílem bylo zjistit, zda všechny testované látky vykazují antiprotozoální aktivitu. Největší toxicitu vykazoval albendazol (metodou Protoxkit FTM při nejvyšší koncentraci jsme naměřili inhibici růstu 65,26% a metodou MTT...

74 ABSTRACT Title of thesis Evaluation of antiprotozoal activity by Tetrahymena pyriformis Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Kralove Department of Pharmaceutical Botany and Ecology Candidate: Daniela Osecká Consultant: Mgr. Jitka Vytlačilová The protozoal pathogens are causing asymptomatic and symptomatic infections. The risk of the disease threatens to almost every man, therefore it is very important the antiprotozoal therapy. Tetrahymena pyriformis is a unicellular organism, which we tested out under the action of three substances, albendazole, mebendazole and ornidazole. We used two methods applied to measuring the viability of protozoan. It is a basic method for testing the inhibition of growth of the organism Protoxkit FTM using the conversion of food biomass in suspension of infusorian and MTT method, which uses the reduction of MTT dye (3 - [4,5-dimethyl-thiazol-2-yl] -2,5-diphenyl-tetrazolium bromide). Spectrophotometrically from the measured data, we build tables and charts, optical density, depending on the time of culture and calculated percent inhibition for five descending concentrations of test substance. Our aim was to determine whether all the test substances showing the antiprotozoal activity. The greatest toxicity showed albendazole (method Protoxkit FTM at the...