Suspenzní kultura Trifolium pratense L. II

Abstract

SOUHRN Lenka Klabanová Suspenzní kultura Trifolium pratense L. II Základním předpokladem úspěšné elicitace, která se využívá ke zvýšení produkce sekundárních metabolitů, je mimo jiné nalezení vhodného elicitoru, jeho koncentrace a optimální doby působení elicitoru na rostlinnou kulturu in vitro, což bylo předmětem této práce. Byl sledován vliv 6, 24, 48 a 168hodinového působení roztoku chloridu hlinitého (v koncentracích 0,1 µmol, 1 µmol, 10 µmol, 100 µmol) na produkci flavonoidů a isoflavonoidů v suspenzní kultuře Trifolium pratense L. varieta Tempus a Sprint. Kultura byla kultivována na médiu podle Gamborga s přídavkem 2 mg.l-1 2,4-dichlorfenoxyoctové kyseliny a 2 mg.l-1 6-benzylaminopurinu, při teplotě 25˚C a světelné periodě 16 hodin světlo/8 hodin tma. Maximální obsah flavonoidů, zjištěný fotometrickým stanovením podle Českého lékopisu 2009, byl prokázán u suspenzní kultury Trifolium pratense L. varieta Tempus (0,276 %) po 168hodinovém působení elicitoru o koncentraci 100 μmol. V porovnání s kontrolní kulturou došlo ke stimulaci produkce o 283 %. V suspenzní kultuře Trifolium pratense L. varieta Sprint byl zjištěn maximální obsah (0,308 %) po 24hodinovém působení elicitoru o koncentraci 10 μmol. Vzhledem ke kontrolní kultuře došlo ke zvýšení produkce o 271 %. Maximální obsah isoflavonoidů (genistinu,...

Lenka Klabanová Suspension Culture of Trifolium pratense L. II A principial precondition for succesful elicitation used to increase the production of secondary metabolities is finding a suitable elicitor, its concentration and the optimal period of time of the action of the elicitor on the plant culture in vitro. It was the aim of the present thesis. The effect was examined of a 6, 24, 48 and 168 hours action of the solution of aluminium trichloride (in concetrations 0,1 µmol, 1 µmol, 10 µmol, 100 µmol) on the production of flavonoids and isoflavonoids in the suspension culture of Trifolium pratense L. variety Tempus and Sprint. Culture was cultivated on a Gamborg medium with an addition of 2 mg.l-1 of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 2 mg.l-1 of 6-benzylaminopurine, at the temperature of 25˚C and 16 hours light/8 hours dark period. The maximal content of flavonoids found by a photometric determination according to Pharmacopoeia Bohemica 2009 was demonstrated in the suspension culture of Trifolium pratense L. variety Tempus (0,276%) after a 168hour action of the elicitor of the 100 μmol concentration. Compared with the control culture was stimulated production of 283%. In Trifolium pratense L. variety Sprint found a maximal content (0.308%) after a 24hour action of the elicitor of the 10 μmol...