Příprava tří myších kongenních kmenů a jejich fenotypizace.

Abstract

ÚVOD 1 ÚVOD Tato diplomová práce vznikala v rámci širšího projektu hybridní sterility, kterým se dlouhodobě zabývá naše laboratoř myší molekulární genetiky. Hybridní sterilita je stav, který způsobuje neplodnost potomků křížení dvou plně plodných rodičovských forem a může tak hrát důležitou speciační roli jako jedna z postzygotických reprodukčních bariér. U myší postihuje především samčí potomky křížení některých standardních laboratorních kmenů (C57BL/6J) Mus musculus domesticus (Mmm) původu s kmeny odvozenými od poddruhu Mus musculus domesticus (Mmd) (PWD/Ph). Pro identifikaci prvního savčí genu hybridní sterility Prdm9 v naší laboratoři (Mihola et al, 2009) byly použity tři transgenní linie s překrývajícími se BACy (bacterial artificial chromosomes), které obsahovaly kandidátní geny včetně Prdm9. Prvním cílem této diplomové práce bylo tedy pokračování v práci s transgenními liniemi, především stabilizace jejich vlastností vytvořením kongenních kmenů na genetickém pozadí standardního inbredního kmene C57BL/6J (B6). Kongenní kmen je speciální inbrední kmen, na jehož definované genetické pozadí je deseti- generačním protokolem zpětných křížení přenesen tzv. diferenciální chromozomální segment. Během šlechtění kongenů se v rámci orientačního měření váhy objevovaly výraznější rozdíly ve váze těla myší...

Mouse congenic strains are widely used as an important genetic tool for various purposes of research. Congenic strains are special inbred strains in which part of the genome of one mouse is transferred to another by backcrossing the donor mouse to the recipient strain with appropriate selection. The classical ten-generation breeding protocol is commonly utilized and adapted for different experimental needs. Our department is focused on the study of hybrid sterility between two related mouse strains M. m. musculus and M. m. domesticus. The first aim of this work was the utilization of congenics to stabilize three transgenic lines, which previously helped to identify first mammalian hybrid sterility gene Hst1 as Prdm9 (Mihola et al, 2009). Bacterial artificial chromosomes (BACs) present in transgenes encompassed several genes including Prdm9. The second goal was to look for some new phenotypes of our congenic strains, which may be causally associated with genes encoded by the BACs, as well as an additional research on the hybrid sterility phenomena. We established three new congenic strains on C57BL/6J (B6) background and found significant differences between transgenics versus their littermate controls in weights of testis, gonadal fat, body, liver, and heart. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)