Stanovení neopterinu a jeho derivátů metodou HPLC s fluorescenční detekcí

Abstract

NÁZEV: Stanovení neopterinu a jeho derivátů metodou HPLC s fluorescenční detekcí ABSTRAKT: Neopterin, derivát pteridinu, je v lidkém organismu produkován monocyty nebo B - lymfocyty po stimulaci interferonem γ, nebo interleukinem - 2. Tyto působky (interferon γ, interleukin - 2) jsou spojeny s aktivací imunitního systému. Měření neopterinu v tělních tekutinách tedy může sloužit při monitorování cytokiny indukované aktivace různých složek imunitního systému. Imunitní aktivace se objevuje například v průběhu mnoha infekčních chorob, při autoimunitních onemocněních a při maligních onemocněních. V poslední době je ve vědeckých pracích popisována také spojitost neopterinu a 7,8 - dihydroneopterinu s intracelulárním oxidativním stresem a apoptózou buněk. Pteridiny tudíž mají pravděpodobně vztah i k určitým neurologickým onemocněním. Plně redukovaná forma biopterinu se v lidském organismu uplatňuje jako kofaktor některých enzymů. Koncentrace neopterinu, případně jiných příbuzných látek, se v klinické praxi vyjadřuje poměrem neopterin / kreatinin. Tato diplomová práce se zabývá vypracováním analytické metody určené k identifikaci a stanovení biologicky aktivních látek biopterinu, 7,8 - dihydroneopterinu, 5,6,7,8 - tetrahydroneopterinu, neopterinu a kreatininu za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC)...

TITLE: Determination of neopterin and its derivates by HPLC with fluorescence detection SUMMARY: Neopterin, a pteridine derivative, is produced in human organism by monocytes or by B - lymphocytes stimulated with interferon γ or interleukine - 2. These active substances (interferon γ, interleukine - 2) are connected with immune system activation. Neopterin measurement in body fluids can therefore serve for monitoring of activation of various components of immune system induced by cytokines. Immune activation occurs for example during many infectious diseases, autoimmune diseases and malignant diseases. Recently the connection between neopterin and 7,8 - dihydroneopterin and intracellular oxidative stress and cell apoptosis was demonstrated in several scientific studies. Values of pteridines probably correlate with certain neurological disesases. Totally reduced form of biopterin serves as cofactor of some enzymes in human organism. In clinical practice the concentration of neopterin, eventually other related substances is expressed as the ratio neopterin / creatinine. This diploma thesis is dealing with the development of an analytical method for the determination of biologically active substances biopterin, 7,8 - dihydroneopterin, 5,6,7,8 - tetrahydroneopterin, neopterin and creatinine by high performance...