Využití průtokové cytometrie při studiu mužské neplodnosti

Abstract

Úvod: Neplodnost párů je v současné době velkým problémem, přičemž na poruchách plodnosti se podílí muž i žena stejnou měrou. Je důležité, aby příčina byla odhalena co nejdříve. Mezi diagnostické možnosti odhalení mužské neplodnosti patří stanovení spermiogramu pomocí průtokové cytometrie a mikroskopického vyšetření spermatu. Cíl: Cílem naší práce je vypracovat přehled možných příčin mužské neplodnosti a souhrn možných vyšetření spermatu průtokovou cytometrií. Dále vyhodnotit data spermiogramů změřená průtokovou cytometrií, získaných od mužů v průběhu let 2008, 2009 a 2010 na Ústavu klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice Hradec Králové, a najít mezi těmito parametry spermií vzájemné závislosti. Dále se práce zabývá optimalizací metodiky vyšetření spermatu průtokovou cytometrií. Metodika: Stanovení parametrů spermií (počet spermií a leukocytů, vitalita spermií, stav jejich akrozomu a přítomnost intra-akrozomálního proteinu) bylo provedeno průtokovým cytometrem Cytomics FC 500 s analyzačním softwarem CXP. Použitá metoda vychází z testu SpermFlow od firmy Exbio. Vzorky ejakulátu byly získány od 163 mužů. Výsledky: Statistická analýza jednotlivých dat našeho souboru ukázala, že muži s nízkým počtem spermií v ejakulátu mají větší podíl spermií s narušeným akrozomem. Skupina mužů s...

Background: Currently infertility of couples is a major problem, whereas the share of man and woman in infertility disorder is alike. It is important to discover the cause of infertility as soon as possible. The diagnostic possibilities of male infertility detection include the examination of sperm by flow cytometry and microscopic examination of semen. Aims: The aim of our work is to draw up an overview of the possible causes of male infertility and a summary of possible examination of semen using flow cytometry. Next aim is to evaluate the data measured by flow cytometry obtained from men over the years 2008, 2009 and 2010 at the Institute of Clinical Immunology and Allergology University Hospital Hradec Králové, Czech Republic, and determine interdependencies between the measured sperm parameters. Further, the work deals with the methodology optimization in examination of semen using flow cytometry. Methods: Determination of sperm parameters (sperm count and leukocyte count, sperm vitality, acrosom status and presence of intra-acrosomal protein) was performed using flow cytometer Cytomics FC 500 with CXP analytic software. The method used is based on the test SpermFlow from the company Exbio. Semen samples were obtained from 163 men. Results: Statistical analysis of our data set showed that men...