Cytotoxicita a metabolismus doxorubicinu v buněčné linii MCF7

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Titul, jméno, příjmení kandidáta: Bc. Veronika Hanušová Titul, jméno, příjmení školitele: Doc. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Cytotoxicita a metabolismus doxorubicinu v buněčné linii MCF-7. Doxorubicin (DOX) patří mezi antracyklinová chemoterapeutika významně se podílející na léčbě mnoha solidních nádorů, včetně karcinomu prsu, ale také mnoha hematoonkologických onemocněních. DOX je metabolizován na 13-OH-doxorubicinol (DOX-OL) produkovaný zejména karbonyl reduktasou 1 (CBR1). DOX-OL je méně antineoplastický, ale více kardiotoxický než původní sloučenina. Cílem této práce bylo studium redukce DOX a testování možného zvýšení cytotoxicity DOX inhibicí jeho reduktas. K experimentům byla zvolena buněčná linie MCF-7, odvozená z prsního adenokarcinomu. Nejprve bylo zjištěno vhodné složení kultivačního média a optimalizován postup při přípravě vzorku pro HPLC analýzu. Při studiu metabolismu DOX v cytosolu MCF-7 buněk působil oracin (potencionální cytostatikum) jako významný kompetitivní inhibitor reduktas DOX. V testech cytotoxicity působil DOX toxičtěji v buňkách s přídavkem séra do média, oracin byl naopak toxičtější v buňkách bez přídavku séra. Kombinace DOXu s oracinem působila toxičtěji než...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Title, Name, Surname of candidate: Bc. Veronika Hanušová Title, Name, Surname of tutor: Doc. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Title of a diploma work: Doxorubicin cytotoxicity and metabolism in MCF-7 cell line. Doxorubicin (DOX) is ranked among anthracycline chemoterapeutics, significantly participant in the treatment of solid tumors, inclusive breast carcinoma and haematologic malignancies. DOX is metabolized to 13-OH-doxorubicinol (DOX-OL) produced by carbonyl reductase 1 (CBR1). DOX-OL is lower antineoplastic, but more cardiotoxic compared to the parent drug. Aim of this work was research of reduction DOX and testing possible increasing cytotoxicity of DOX through inhibition his reductase. For experiments has been selected human breast cancer cell line MCF-7. Initially has been elicit optimal composition of cultural medium and optimalized process on sample preparation for HPLC. In the study of DOX metabolism in cytosol the MCF-7 cells act oracin (potentional chemoterapeutic) as significantly kompetition's inhibitor of DOX reductases. In cytotoxicity tests acted DOX more toxic in cells with bovine serum in medium, oracin was again more toxic in cells without bovine serum. Combination DOX with oracin...