Molekulární markery ovlivňující přežití transplantované ledviny a progresi glomerulopatií

Abstract

Na progresi chronických glomerulopatií, i na odhojování transplantované ledviny má vliv řada prozánětlivých cytokinů, jejichž role v patogenezi poškození není dosud detailně popsána. Cílem této disertační práce bylo identifikovat spolehlivé markery rizika progrese renální dysfunkce a přispět tak k efektivnější léčbě pacienta. Analyzovány byly vzorky biopsií nativních ledvin s histologicky potvrzenou glomerulopatií a biopsií ledvinných štěpů. Intrarenální genové exprese byly měřeny metodou RT- qPCR, jednonukleotidové polymorfizmy detekovány metodami založenými na PCR-RFLP. Pro hodnocení mononukleárního infiltrátu bylo využito imunohistochemické barvení. Na naměřených datech byla provedena statistická analýza. V době diagnózy IgA nefropatie byla zjištěna korelace genových transkriptů TGF-β1, HGF, BMP7, MCP-1 a RANTES a mononukleárního infiltrátu se sníženou renální funkcí a proteinurií. Ve dvouletém sledování závisela progrese IgAN na tíži chronické vaskulopatie a na míře exprese genu pro TGF-1. Pacienti po transplantaci ledviny s dysfunkcí štěpu a zvýšenou intrarenální expresí genu pro TGF-1 a MCP-1 měli zkrácenou dobu přežívání transplantované ledviny. V době biopsie měli pacienti s dysfunkcí štěpu upregulovány také mRNA genů pro IL- 10, TGF-1, IL-6, MCP-1, RANTES a TNF-. Míra tubulitidy ve...

The progression of chronic glomerulopathy and graft rejection is affected by a number of proinflammatory cytokines, whose role in the pathogenesis of damage is poorly understood. The aim of this dissertation was to identify reliable risk markers of renal dysfunction progression and thereby contribute to a more effective patient treatment. Human native kidney biopsies with histologically confirmed diagnosis of glomerulopathy or kidney graft biopsies were analysed. Intrarenal gene expressions were measured by RT-qPCR. Single nucleotide polymorphisms were detected by methods based on PCR-RFLP. Immunohistochemical staining was used to identify and quantify the mononuclear cell infiltration. Gene expression of TGF-β1, HGF, BMP7, MCP-1, RANTES and mononuclear cell infiltration were associated with poor renal function and proteinuria at the time of IgA nephropathy diagnosis. Progression of IgA nephropathy during the 2-year follow-up was shown to be dependent on the degree of chronic vasculopathy and TGF-1 expression in the kidney. Patients with graft dysfunction and enhanced intrarenal expression of TGF-1, MCP-1 had significantly shorter graft survival. Higher mRNA expression of IL-10, TGF- 1, IL-6, MCP-1, RANTES and TNF- was observed in patients with graft dysfunction presented at the time of biopsy....